Цитология  2016  58 (1) : 16–22
ИЗМЕНЕНИЕ УЛЬТРАСТРУКТУРЫ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК В ЦИКЛЕ МОНОСЛОЙ-СФЕРЫ-МОНОСЛОЙ

М.Г. Мартынова,1 Т.А. Крылова, О.А. Быстрова

Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, 194064;
1 электронный адрес: mgmart14@mail.ru

Сферообразование стволовых клеток (СК) может использоваться для их подготовки к транспланта-ции. Методом электронной микроскопии исследованы СК, изолированные из субэпикардиальной жировой ткани человека, на последовательных стадиях цикла монослой-сферы-монослой. При индуцировании сферообразования с использованием методов "неадгезивной поверхности" и "висячей капли" были получены сходные результаты. На первых 2-3 пассажах ультраструктура изолированных СК была сходна с ультраструктурой эмбриональных клеток (стадия 1). При дальнейшем пассировании (стадия 2) СК становились более электронно-плотными с лобчатым ядром, развитым шероховатым эндоплазматическим ретикулумом (ШЭР), выраженным аппаратом Гольджи и многочисленными вакуолями. Через 2 ч от момента инициации сферообразования (стадия 3) СК собирались в кластеры с формированием десмосомоподобных межклеточных контактов. Ядра СК содержали большие ядрышки с рыхлой фибро-гранулярной организацией, цитоплазма была заполнена разрушающимися канальцами ШЭР, аппарат Гольджи не обнаружен. Через 24 ч (стадия 4) СК в хорошо сформированных сферах имели большие плотные ядрышки и слабо развитые аппарат Гольджи и ШЭР. В течение 1-х сут после диссоциации сфер (стадия 5) ультраструктура СК становилась подобной ультраструктуре эмбриональных клеток и СК первых пассажей, за исключением наличия большого ядрышка и нескольких комплексов Гольджи. Еще через 1 сут (стадия 6) СК напоминали электронно-плотные СК второй стадии - они содержали неправильной формы ядро и цитоплазму, заполненную канальцами ШЭР. Полученные результаты мы интерпретируем как омоложение СК сразу после диссоциации сфер и старение СК по мере пассирования после изоляции из ткани и через 1 сут после диссоциации сфер. Необходимы дальнейшие исследования для выявления генетических, биохимических и физиологических параметров СК на установленных морфологически различимых стадиях сферообразования в целях получения высококачественного материала для клеточной терапии.

Ключевые слова:  стволовые клетки, субэпикардиальная жировая ткань, сферообразование, ультраструктура


|  Full text  |  Back  |  Contents  |  Main  |