ПАНЕЛЬ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ ПРОТИВ ЭНДОГЛИНА ЧЕЛОВЕКА: ПОЛУЧЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА
И.В. Смирнов,1,2 И.В. Грязева,1 М.П. Самойлович,1,3 Л.А. Терёхина,1
А. А. Пиневич,1,3 А. А. Крылова,1 И.Ю. Крутецкая,1
Н.Н. Никольский,2 В.Б. Климович 1,*
1 Российский научный центр радиологии и хирургических технологий, Санкт-Петербург, 197758,
2 Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, 194064,
и 3 С.-Петербургский государственный университет, 199034;
* электронный адрес: vklimovich@gmail.com
Эндоглин (CD105)—маркер эндотелиальных и мезенхимных стромальных клеток, который входит
в состав рецепторных комплексов, связывающих ростовые факторы TGF-β, BMP-9 и BMP-10. Его экспрессия
значительно возрастает в сосудах ишемизированных тканей и растущих опухолей. Определение
концентрации растворимой формы эндоглина в сыворотке и моче используется как один из методов
диагностики онкологических заболеваний и патологии беременности. Цель работы состояла в создании
нового семейства гибридом-продуцентов моноклональных антител (МКАТ) для выявления эндоглина
на клеточных мембранах и в биологических жидкостях. В качестве иммуногена использовали синтезированный
в клетках мышиной миеломы рекомбинантный внеклеточный участок молекулы эндоглина.
Донорами иммунных спленоцитов служили мыши F1(SJL/J×BALB/c). Для скрининга гибридом и характеристики
продуцируемых МКАТ использовали рекомбинантные аналоги антигена, синтезированные
в клетках Escherichia coli, а также экспрессирующие CD105 перевиваемые клеточные линии и культуры
МСК человека. Получено десять новых МКАТ, распознающих не менее восьми отдельных эпитопов
эндоглина. Восемь МКАТ взаимодействуют с мембранной формой эндоглина на поверхности
нормальных и трансформированных клеток человека. Два МКАТ специфичны к линейным эпитопам
полипептидной цепи и предназначены для выявления эндоглина методом иммуноблотинга. На основе
двух МКАТ разработана система двухцентрового иммуноферментного анализа (ИФА), выявляющая
растворимый эндоглин в культуральных средах.
Ключевые слова:
эндоглин, CD105, моноклональные антитела
| Full text
| Back
| Contents
| Main |
|
