ИССЛЕДОВАНИЕ КЛЕТОЧНОЙ ЛОКАЛИЗАЦИИ Hrs И ДРУГИХ МАРКЕРОВ ЭНДОСОМ В СПЕРМАТОГЕНЕЗЕ DROSOPHILA MELANOGASTER
С ПОМОЩЬЮ ХИМЕРНЫХ GFP-КОНСТРУКТОВ
Е.В. Мариловцева,1 Т.Д. Дубатолова,1 Ю.А. Галимова,1
С.А. Копыл,1 Л.В. Омельянчук 1,2
1 Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, 630090,
и 2 Новосибирский государственный университет, Новосибирск, 630090;
2 электронный адрес: ome@mcb.nsc.ru
Акросома — специализированная органелла сперматозоидов, необходимая для оплодотворения
ооцита, формирующаяся, согласно разным теориям, либо из везикул аппарата Гольджи, либо из эндосом
и лизосом. Hrs (hepatocyte growth factor regulated tyrosine kinase substrate) — мультидоменный белок
комплекса ESCRT-0, принимающий участие в сортировке поглощенных в ходе эндоцитоза белков. Для
млекопитаюющих показана способность Hgs (гомолога Hrs) связываться с акросомой, однако аналогичная
способность Hrs дрозофилы не была изучена. Мы показали, что в семенниках экспрессируются две
белковые формы Hrs: более длинная форма Hrs-B и укороченная форма Hrs-A, в которой отсутствуют
домен VHS и часть домена FYVE, принимающие непосредственное участие в заякоривании Hrs на эндосомах.
Мы также обнаружили, что в отличие от Hrs млекопитающих изоформа Нrs-B и почти полностью
идентичная ей усеченная форма Hrs8 ([290—760]) локализуются не на акросомах, а на фьюзомах сперматоцитов.
Данная локализация требует наличия в молекуле белка участка, расположенного между аминокислотными
остатками 383 и 472, предположительно соответствующего NF2- и (или) STAM-связывающему
доменам. In situ-гибридизация мРНК Нrs показала, что ген hrs экспрессируется в раннем сперматогенезе,
и это подтверждает данные о связывании Hrs с фьюзомами сперматоцитов и отсутствии белка
Hrs в позднем сперматогенезе. Кроме того, мы показали, что Hrs не принимает участия в регуляции и
осуществлении цитокинеза. Наконец, несмотря на отсутствие Hrs на акросоме дрозофилы, мы детектировали
на органелле маркеры эндомом Rab4, Rab7 и Rab11, что свидетельствует в пользу эндосомальной
гипотезы акросомогенеза.
Ключевые слова:
vesicular traffic, endosome, endocytosis, spermatogenesis, acrosome, fusome
| Full text
| Back
| Contents
| Main |
|
