ВЛИЯНИЕ АНТИБИОТИКА ДОКСОРУБИЦИНА НА ФИБРОБЛАСТЫ ЧЕЛОВЕКА,
ИНФИЦИРОВАННЫЕ ЦИТОМЕГАЛОВИРУСОМ
Н.Е. Федорова,1 С.С. Емельянова,2 Г.Р. Виноградская,2,3,* Е.В. Чичев,1 А.В. Мурзакова,1
А.А. Кириченко,1 В.Н. Вербенко,2А.А. Кущ 1
1 Научно-исследовательский институт вирусологии им. Д.И. Ивановского Министерства здравоохранения РФ, Москва;
2 Петербургский институт ядерной физики им. Б.П. Константинова, НИЦ «Курчатовский институт», Санкт-Петербург,
и 3 Кафедра биофизики С.-Петербургского государственного политехнического университета;
* электронный адрес: gvinogradskaya@mail.ru
Противораковый антибиотик доксорубицин (ДОКС) характеризуется высокой токсичностью, вызывая
осложнения в работе жизненно важных органов. Данных о действии ДОКС на нормальные клетки
организма недостаточно. Предполагают, что ДОКС индуцирует гибель раковых клеток путем апоптоза,
однако сведения о роли белка р73, члена семейства опухолевого супрессора р53, практически отсутствуют.
Известно, что цитомегаловирус (ЦМВ) индуцирует антиапоптозную программу, позволяющую
вирусу осуществить репликацию своего генома до гибели клетки-мишени. Цель настоящей работы состояла
в изучении действия ДОКС на нормальные клетки, анализе способности антиапоптозной программы,
запускаемой ЦМВ, оказывать влияние на токсичность ДОКС и в оценке участия белка р73 и
его изоформ в регуляции гибели инфицированных клеток под действием ДОКС. Подсчет клеток в цитологических
препаратах показал, что в течение 24 ч ДОКС вызывает гибель около 70 % фибробластов
легкого эмбриона человека (ФЛЭЧ) в культуре in vitro, а при сочетанном действии ДОКС и ЦМВ гибель
клеток уменьшается. Методом TUNEL определено, что количество клеток с разрывами ДНК при действии
ДОКС снижается с 5.2 до 3.2 % (P < 0.05) при воздействии на ЦМВ-инфицированные клетки. Анализ
митотических фигур выявил накопление клеток в митозе под действием ДОКС, тогда как в инфицированных
ЦМВ клетках подобного явления не наблюдали. Анализ мРНК двух изоформ белка р73
(ТАр73 и dNp73) показал, что в неинфицированных клетках экспрессия изоформы ТАр73 очень низкая,
тогда как в ЦМВ-инфицированных ФЛЭЧ уровень транскрипции изоформы ТАр73 значительно повышен,
и впервые обнаружена экспрессия изоформы dNр73. В инфицированных клетках, обработанных
ДОКС, не происходило блока митоза, но наблюдалась активация каспаз 8, 9 и 3, которая сопровождалась
гибелью клеток, однако не столь массовой, как при действии ДОКС. Полученные данные позволяют
заключить, что ЦМВ ослабляет повреждающее действие ДОКС на нормальные клетки. Можно предположить,
что индукция ТАр73 и появление укороченной изоформы р73 создают условия для аттенуации
влияния ДОКС на повреждение ДНК и гибель нормальных клеток.
Ключевые слова:
доксорубицин, фибробласты человека, цитомегаловирус, изоформы ТАр73 и dNp73 белка р73
| Full text
| Back
| Contents
| Main |
|
