Цитология  2015  57 (3) : 222–232
РЕОРГАНИЗАЦИЯ АКТИНОВОГО ЦИТОСКЕЛЕТА И СИСТЕМЫ МИКРОТРУБОЧЕК ЭНДОТЕЛИОЦИТОВ ВЕНЫ ЧЕЛОВЕКА В ПРОЦЕССЕ ФОРМИРОВАНИЯ МЕЖКЛЕТОЧНЫХ КОНТАКТОВ

A.C. Шахов, В.Б. Дугина, И Б. Алиева 1

Институт физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова;
1 электронный адрес: irina_alieva@belozersky.msu.ru

Эндотелиальные клетки, плотно прилегающие друг к другу и выстилающие внутреннюю поверхность всех сосудов организма, обеспечивают регуляцию проницаемости сосудистой стенки и обмен между циркулирующей в сосудах кровью и тканевой жидкостью тех органов, в которых эти сосуды расположены. В условиях in vitro монослой эндотелиоцитов сохраняет основную — барьерную — функцию нативного эндотелия, в связи с чем его можно использовать как модельную систему в экспериментах по исследованию взаимодействия цитоскелетных и адгезионных структур эндотелиоцитов. В настоящей работе культивируемый монослой клеток эндотелия вены человека использовали для количественной оценки изменений цитоскелета эндотелиальных клеток от момента распластывания и образования первых межклеточных контактов до формирования конфлюэнтного монослоя. Система актиновых филаментов в клетках венозного эндотелия представлена кортикальной сетью актина и пучками актиновых стресс-фибрилл, организованных параллельно субстрату. В клетках экспрессируются две основные немышечные изоформы актина — β- и γ-цитоплазматические актины. При мечении антителами против β-актина обнаруживаются пучки актиновых фибрилл, в то время как антитела против γ-актина выявляют кортикальную и ламеллярную сети. Для оценки состояния структур актинового цитоскелета анализировали интенсивность их флуоресценции в районе свободного края и в области контакта с соседней клеткой. Интенсивность флуоресценции β-актиновых структур оказалась выше в областях контакта. Интенсивность флуоресценции γ-актиновых структур была наибольшей на ведущих краях ламелл и наименьшей — на стабильных краях в клетках с большой протяженностью межклеточных контактов. Формирование эндотелиального монослоя сопровождалось изменениями в системе микротрубочек: их количество увеличивалось на краю клетки, причем количество микротрубочек в районе уже сформированных межклеточных контактов всегда было выше, чем в области свободной ламеллы клетки.

Ключевые слова:  эндотелий, цитоскелет эндотелиальных клеток, γ-актин, β-актин, микротрубочки


|  Full text  |  Back  |  Contents  |  Main  |