ИНДУКЦИЯ АПОПТОЗА И НЕКРОЗА КЛЕТОК ЭНДОТЕЛИЯ ПУПОЧНОЙ ВЕНЫ ЧЕЛОВЕКА ПЕРОКСИДОМ ВОДОРОДА
А.Д. Надеев,1,* И.В. Кудрявцев,2,3 М.К. Серебрякова,2 П.В. Авдонин,4 В.П. Зинченко,1 Н.В. Гончаров 5,6
1 Институт биофизики клетки РАН, Пущино, 142290, 2 Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины,
Санкт-Петербург, 197376, 3 Дальневосточный федеральный университет, Владивосток, 690091,
4 Институт биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН, Москва, 119334,
5 Научно-исследовательский институт гигиены, профпатологии и экологии человека
ФМБА России, Санкт-Петербург, 188663, и 6 Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН, Санкт-Петербург, 194223;
* электронный адрес: madeev1987@gmail.com
Проведена оценка соотношения раннего апоптоза и позднего апоптоза (некроза) в процессе гибели культивируемых эндотелиальных клеток пупочной вены человека
при воздействии пероксида водорода (H2O2) в условиях in vitro, максимально приближенных к физиологическим (высокая плотность клеток,
высокое содержание сыворотки, концентрация H2O2 не более 500 мкМ). Жизнеспособность клеток определяли с помощью проточной
цитометрии и сочетанного применения флуоресцентных зондов PO-PRO-1, выявляющего гибнущие клетки начиная со стадии раннего апоптоза, и DRAQ7, окрашивающего
клетки на финальной стадии апоптоза и некротические клетки. Полученные данные свидетельствуют о том, что первичным механизмом развития цитотоксического
эффекта H2O2 является апоптоз. Критической концентрацией H2O2, вызывающей гибель популяции клеток,
находящихся в плотном монослое, является 250 мкМ. Меньшие концентрации H2O2 (200 мкМ и ниже) обусловливают гибель отдельных клеток,
однако жизнеспособность популяции эндотелиальных клеток в монослое сохраняется; реакция на агонисты, вызывающие мобилизацию внутриклеточного кальция,
не изменяется по сравнению с контрольными клетками.
Ключевые слова:
пероксид водорода, эндотелий, цитотоксичность, апоптоз, некроз
| Full text
| Back
| Contents
| Main |
|
