ХАРАКТЕРИСТИКА НОВОЙ ЛИНИИ МЕЗЕНХИМНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ ЭМБРИОНАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА
А.М. Кольцова, В.В. Зенин, Т. К. Яковлева, Г.Г. Полянская 1
Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, 194064;
1 электронный адрес: poljansk@mail.cytspb.rssi.ru
Получена новая неиммортализованная фибробластоподобная клеточная линия человека из линии SC6 эмбриональных стволовых клеток (ЭСК). Количественный и
структурный кариотипический анализ показал, что эта линия имеет гиподиплоидный кариотип: 45, Х0. Среднее время удвоения клеточной популяции составляет
26.0 ± 0.4 ч на 8-м пассаже и 82.0 ± 9.2 ч на 18-м. Кривые роста свидетельствуют об активной пролиферации клеток в течение 8-10 пассажей, затем наблюдается
постепенное снижение пролиферативной активности, которая прекращается к 20-му пассажу. Для определения статуса этих линий провели анализ поверхностных
маркеров с помощью проточной цитофлуориметрии и выявили экспрессию поверхностных антигенов, характерных для мезенхимных стволовых клеток (МСК) человека:
CD44, CD73, CD90, CD105 и HLA-ABC и отсутствие экспрессии CD34 и HLA-DR. Но уровень экспрессии поверхностных маркеров CD90 и CD105 в линии SC6-MSC ниже,
чем в других линиях МСК, в частности в линии SC5-MSC, полученной из линии SC5 эмбриональных стволовых клеток. Иммунофлуоресцентный анализ экспрессии
поверхностных маркеров и транскрипционного фактора Oct-4, характерных для ЭСК человека, показал отсутствие экспрессии Oct-4 и наличие экспрессии SSEA-4 и
TRA-1-60, характерной для ряда кариотипически нормальных линий МСК. С помощью иммунофлуоресцентного анализа в клетках полученной линии, так же как и в ранее
полученных линиях с нормальным кариотипом, показана экспрессия маркеров ранней дифференцировки в производные трех зародышевых листков, характеризующих
ЭСК, что, возможно, обеспечивает широкие возможности МСК при репарации разных тканевых повреждений в зависимости от соответствующего микроокружения.
Показана способность клеток линии SC6-MSC направленно дифференцироваться в остеогенном и хондрогенном направлениях и не дифференцироваться в адипогенном
направлении. Полученные результаты с большой вероятностью могут свидетельствовать о том, что нарушение хромосомного и соответственно генного баланса в линии
SC6-MSC с кариотипом 45, Х0 привело к уменьшению дифференцировочного потенциала, существенному уменьшению экспрессии CD90, связанной, в частности, с процессами дифференцировки и старения клеток.
Ключевые слова:
линии мезенхимных стволовых клеток, кариотипическая нестабильность, иммунофлуоресцентный анализ, клеточные маркеры, дифференцировка
| Full text
| Back
| Contents
| Home |
