Цитология  2015  57 (11) : 796–807
ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ СВЯЗЬ МЕЖДУ ТРАНСПОРТНЫМИ ХАРАКТЕРИСТИКАМИ МОНОСЛОЯ КЛЕТОК MDCK1 И ОРГАНИЗАЦИЕЙ ИХ АКТИНОВОГО ЦИТОСКЕЛЕТА

А.Н. Горшков,1,2,* М.Р. Зайцева,1,3 Е.С. Снигиревская,1 Я.Ю. Комиссарчик 1,3

1 Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, 194064, 2 Научно-исследовательский институт гриппа Министерства здравоохранения РФ, Санкт-Петербург, 197376, и 3 С.-Петербургский государственный университет, 199034;
* электронный адрес: angorsh@yahoo.com

На клеточном монослое MDCK1 исследованы динамика пространственной организации актинового цитоскелета и динамика трансэпителиального электрического сопротивления (TEER) при воздействии аргинин-вазопрессина (AVP) и активатора протеинкиназы А (PKA) форсколина. Установлено, что воздействие данных физиологически активных веществ приводит к деполимеризации фибриллярного актина в клетках MDCK1 (как в апикальной, так и в базальной цитоплазме) и одновременно к значительному снижению трансэпителиального сопротивления клеточного монослоя. Снижение TEER свидетельствует об увеличении ионного тока через клеточный монослой. Соответственно, созданный ионный градиент стимулирует AVP-чувствительный поток воды. Для уточнения путей движения ионов и воды в монослое MDCK было проведено иммунофлуоресцентное исследование локализации клаудинов 1 и 2 в плотных контактах клеток MDCK ATCC (American Type Culture Collection) (низкое TEER) и MDCK1 (высокое TEER). В плотных контактах клеток MDCK ATCC обнаружены клаудины 1 и 2. В плотных контактах клеток MDCK1 обнаружен клаудин 1 и отсутствует порообразующий клаудин 2. При воздействии форсколина на клетки MDCK1 не наблюдается изменений в распределении изучаемых клаудинов. Это позволяет предполагать, что снижение TEER при действии форсколина связано с изменением трансцеллюлярной, а не парацеллюлярной проницаемости монослоя.

Ключевые слова:  аргинин-вазопрессин, клетки MDCK, трансэпителиальное сопротивление, актиновый цитоскелет


|  Full text  |  Back  |  Contents  |  Home  |