СРАВНИТЕЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ЛИНИЙ
МЕЗЕНХИМНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК, ПОЛУЧЕННЫХ ИЗ КОСТНОГО МОЗГА
И МЫШЦЫ КОНЕЧНОСТИ РАННЕГО ЭМБРИОНА ЧЕЛОВЕКА
Т.А. Крылова, А.С. Мусорина, В.В. Зенин, Т.К. Яковлева, Г.Г. Полянская 1
Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург;
1 электронный адрес: poljansk@mail.cytspb.rssi.ru
Проведен сравнительный анализ характеристик линий мезенхимных стволовых клеток (МСК), выделенных
из 5—6-недельного эмбриона, из разных тканей: костного мозга (линия FetMSC) и мышцы зачатка
конечности (линия M-FetMSC). Основные характеристики линий получены на 6-м пассаже. Среднее
время удвоения клеточной популяции составляет 33.0 ± 1.4 и 25.0 ± 0.1 ч для линий FetMSC и
M-FetMSC соответственно. Кривые роста свидетельствуют об активной пролиферации клеток обеих линий.
Количественный и структурный кариотипический анализ показал, что линия M-FetMSC имеет нормальный
кариотип 46, XY, что ранее было показано для линии FetMSC. С целью определения статуса
этих линий провели сравнительный анализ поверхностных маркеров с помощью проточной цитофлуориметрии.
Анализ выявил в обеих линиях экспрессию поверхностных антигенов, характерных для МСК
человека: CD44, CD73, CD90, CD105, HLA-ABC, виментин и отсутствие экспрессии CD34 и
HLA-DR. Показана способность клеток обеих линий дифференцироваться в остеогенном, хондрогенном
и адипогенном направлениях. Иммунофлуоресцентный и цитофлуориметрический анализ экспрессии
поверхностных маркеров и транскрипционного фактора Oct-4, характерных для ЭСК человека, показал
отсутствие в обеих линиях экспрессии TRA-1-60, низкий уровень экспрессии Oct-4, но высокий уровень
экспрессии SSEA-4. Иммунофлуоресцентный анализ выявил экспрессию маркеров ранней дифференцировки
в производные трех зародышевых листков, характеризующих ЭСК, что, по-видимому, обеспечивает
широкие возможности МСК при репарации разных тканевых повреждений в зависимости от соответствующего
микроокружения. Несмотря на подтверждение статуса МСК для обеих линий, обнаружен
ряд различий между ними, связанных с ростовыми характеристиками и с дифференцировочным потенциалом.
Дифференцировочный потенциал в адипогенном направлении у линии M-FetMSC снижен по
сравнению с FetMSC. В процессе индуцированной скелетно-мышечной дифференцировки выявляются
Z-диски в саркомерах клеток только линии М-FetMSC. Эти результаты позволяют предполагать возможное
влияние разного микроокружения, в котором находились клетки в организме до перевода их в
культуру.
Ключевые слова: линии мезенхимных стволовых клеток человека, иммунофлуоресцентный
анализ, поверхностные клеточные маркеры, кариотип, дифференцировка
| Full text
| Back
| Contents
| Main |
