ДЕЙСТВИЕ БИОГЕННЫХ И АБИОГЕННЫХ ДИСУЛЬФИДОВ НА КЛЕТКИ ЭНДОТЕЛИЯ В КУЛЬТУРЕ: СРАВНЕНИЕ ТРЕХ МЕТОДОВ ОЦЕНКИ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ
Д.С. Прокофьева,1,* Н.В. Гончаров 1,2
1 Научно-исследовательский институт гигиены, профпатологии и экологии человека Федерального медико-биологического агентства и
2 Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И. М. Сеченова РАН, Санкт-Петербург;
* электронный адрес: darija-p1@yandex.ru
Влияние биогенных и абиогенных дисульфидов на жизнеспособность клеток эндотелия пупочной вены человека в культуре исследовали, применяя три метода - включение в
клетки нейтрального красного (НК), определение количества АТФ в клетках и варианты метода Мосмана, суть которых состоит в восстановлении клетками солей тетразолия -
MTT и MTS (Mosmann, 1983). В качестве абиогенного дисульфида был выбран 2,2R-дитио-бис(N,N-диэтил)этанамин (ДС), а в качестве биогенных дисульфидов использовали
окисленный глутатион (GSSG) и масло чеснока (МЧ), мажорным компонентом которого является диаллилдисульфид (ДАДС). Установлено, что ДС и МЧ обладают сопоставимым
цитоток-сическим действием (ЕС50 составляет ~0.6 мМ), в то время как GSSG в концентрациях вплоть до 1 мМ не влияет на жизнеспособность клеток эндотелия.
Впервые показана медиаторная активность ДС и МЧ по отношению к оксидоредуктазам плазматической мембраны клеток эндотелия при использовании в качестве субстрата
солей тетразолия, обусловливающая ложноотрицательный эффект. В связи с этим метод Мосмана имеет серьезные ограничения при оценке влияния дисульфидов на
жизнеспособность клеток, но может быть использован при исследовании механизма их действия.
Ключевые слова: дисульфиды, глутатион, масло чеснока, эндотелий, цитотоксичность
| Full text
| Back
| Contents
| Main |
