ИССЛЕДОВАНИЕ РЕПАРАТИВНЫХ ФОКУСОВ В ЭМБРИОНАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТКАХ МЫШИ ПОСЛЕ ПОВРЕЖДЕНИЯ ДНК
И.И. Суворова,1,2,* В.А. Поспелов 1,2
1 Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, 2 Санкт-Петербурггский государственный университет;
*электронный адрес: irsuvorov@yandex.ru
При действии генотоксических агентов клетки активируют сигнальные пути, участвующие в распознавании ДНК-повреждений, формировании фокусов репарации
и остановке в клеточном цикле (чекпойнт-ответ). Все эти сигнальные пути координируются сенсорными киназами АТМ и ATR. В отличие от соматических клеток
эмбриональные стволовые клетки мыши (мЭСК) не имеют функциональной контрольной точки в фазе G1 и подвергаются только временной задержке
на границе фаз G2/M. В настоящей работе исследовали способность мЭСК распознавать повреждения ДНК и формировать фокусы репарации после
облучения. Показано, что облучение вызывает в мЭСК активацию киназ АТМ (Ser1981) и ATR (Ser428), которые затем фосфорилируют ключевую мишень в
создании репаративных фокусов гистона Н2АХ с образованием фокусов γН2АХ. Совместно с фокусами γН2АХ, маркирующими разрывы ДНК, были
обнаружены белки, участвующие в репарации, - Rad51 и DNA-PK, а также важный регулятор чекпойнт-ответа 53BP1. С помощью ингибиторов киназ АТМ, ATR,
Chk1 и Chk2 было показано, что вклад сигнального каскада ATR/Chk1 в регуляцию клеточного цикла и выживаемость мЭСК после облучения больше, чем ATM/Chk2,
так как подавление активности ATR-Chk1 (в отличие от ATM/Chk2) усиливает действие облучения мЭСК. Таким образом, мЭСК способны к распознаванию
повреждений ДНК и формированию репаративных фокусов, однако механизмы их клеточного ответа на генотоксическое воздействие существенно отличаются
от соматических клеток.
Ключевые слова: эмбриональные стволовые клетки мыши, разрывы ДНК, ATM, ATR, γН2АХ,
репарация ДНК
| Full text
| Back
| Contents
| Main |
|
