СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА МЕТОДОВ ПОЛУЧЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНО АКТИВНЫХ ДИФФЕРЕНЦИРОВАННЫХ МЫШЕЧНЫХ КЛЕТОК
Н.А. Смолина, А.Я. Давыдова, И.А. Щукина, А.В. Карпушев, А.Б. Малашичева, Р.И. Дмитриева, А.А. Костарева 1
Федеральный центр сердца, крови и эндокринологии им. В. А. Алмазова, Санкт-Петербург;
1 электронный адрес: kostareva_aa@almazovcentre.ru
Для успешного изучения патогенеза мышечных заболеваний требуются информативные клеточные модели. В настоящее время не существует универсальной
культуры мышечных клеток, которая могла бы являться единым стандартом для исследования патофизиологии мышечных и нейромышечных забо-леваний.
Многие клеточные линии не обладают достаточной степенью дифференцировки, функционально незрелые и не всегда могут подвергаться генетическим
модификациям. Целью данной работы был выбор доступной и информативной клеточной модели дифференцированных мышечных клеток, которая была бы пригодна
для комплексного изучения функциональных свойств миоцитов и патогенеза мышечных заболеваний in vitro. Анализировали мультипотентные мезенхимные
стволовые клетки человека, терминально дифференцированные миофибриллы мыши и первичные сателлитные клетки мыши. Показано, что лишь небольшая часть
мезенхимных стволовых клеток и только при сокультивировании с клетками линии C2C12 способна к дифференцировке в мышечном направлении. В первичных
миофибриллах мыши лентивирусная трансдукция оказывалась токсичной, и трансдуцированные клетки были не способны реагировать на стимуляцию, т. е. были
физиологически неактивны. Сателлитные клетки наиболее эффективно подвергались лентивирусной трансдукции и были способны в условиях дифференцировки
формировать миотрубки. Функциональный анализ полученных миотрубок показал их способность отвечать сокращением на электрическую и химическую стимуляции.
Наличие кальциевых и натриевых каналов в мембране миотрубок было подтверждено методом пэтч-кламп. Таким образом, наиболее перспективными для
дальнейшего применения оказались сателлитные клетки, которые в дифференцированном состоянии по морфологическим и функциональным признакам наиболее
схожи со зрелыми мышечными клетками, миофибриллами и, кроме того, могут подвергаться генетическим мо-дификациям.
Ключевые слова: мышечные клетки, сателлитные клетки, мультипотентные мезенхимные стромальные
клетки, миофибриллы
| Full text
| Back
| Contents
| Main |
|
