СОЗДАНИЕ КЛЕТОЧНОЙ ЛИНИИ НА ОСНОВЕ КЛЕТОК HEK293, СТАБИЛЬНО ЭКСПРЕССИРУЮЩЕЙ ПРОТЕАСОМНУЮ СУБЪЕДИНИЦУ
PSMD14, СЛИТУЮ С ФЛУОРЕСЦЕНТНЫМ БЕЛКОМ EGFP И ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬЮ HTBH
В.А. Куличкова,1 Ю.Я. Зайкова,1 Ю.Б. Ермолаева,1 Е.В. Виноградова,2
Л. Хуанг,3 А.Н. Томилин,1 Н.А. Барлев,1,4,5 А.С. Цимоха 1,*
1 Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, 2 С.-Петербургский государственный университет,
3 Калифорнийский университет, США, 4 С.-Петербургский государственный технологический институт и
5 Университет г. Лестер, Великобритания;
* электронный адрес: atsimokha@mail.cytspb.rssi.ru
В настоящей работе селекционирована стабильная клеточная линия на основе эмбриональных клеток почек человека HEK293, экспрессирующая протеасомную
субъединицу PSMD14, слитую с зеленым флуоресцентным белком EGFP и последовательностью HTBH. Показано, что белок PSMD14-EGFP-HTBH встраивается
в протеасомы и такие комплексы обладают основной для протеасом химотрипсин-подобной пептидазной активностью. Сконструированная и селекционированная
клеточная линия может использоваться в дальнейших флуоресцентных исследованиях локализации протеасом в клетке.
Ключевые слова: аффинная очистка, зеленый флуоресцентный белок,
химотрипсин-подобная пептидазная активность, протеасомы
| Full text
| Back
| Contents
| Main |
|
