СРАВНИТЕЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК, ИЗОЛИРОВАННЫХ ИЗ ПОДКОЖНОЙ И СУБЭПИКАРДИАЛЬНОЙ
ЖИРОВОЙ ТКАНИ
Т.А. Крылова,1 О.А. Быстрова,1 А.А. Худяков,1,2 А.Б. Малашичева,2,3
О.М. Моисеева,2 В.В. Зенин,1 М.Г. Мартынова 1
1 Институт цитологии РАН, 2 Федеральный центр сердца, крови и эндокринологии им. В.А. Алмазова МЗ РФ, Санкт-Петербург,
и 3 кафедра эмбриологии С.-Петербургского государственного университета;
электронный адрес: heartdev@mail.cytspb.rssi.ru
Стволовые клетки (СК) значительно варьируют по морфологическим, иммунофенотипическим,
пролиферативным характеристикам и способности к дифференцировке в зависимости от своего тканевого
происхождения. Сравнительный анализ их биологических свойств существен для оптимального
выбора СК в регенеративной терапии. Методами иммуноцитохимии, проточной цитометрии, гистохимии
и ОТ-ПЦР мы исследовали СК, полученные из субэпикардиальной жировой ткани (СЭК-ЖТ) и подкожной
жировой ткани (ПК-ЖТ) человека при их культивировании в одинаковых условиях без применения
факторов, стимулирующих дифференцировку. Культуры оказались сходными по высокому
содержанию PCNA-положительных клеток. В обеих культурах иммунофенотипирование выявило высокую
долю клеток, экспрессирующих маркеры мезенхимных СК, CD29, CD44, CD73 и CD105, низкую
долю клеток, экспрессирующих CD31, CD34 и CD45, и широкую вариабельность количества клеток, экспрессирующих
CD117, CD146 и CD309. Единственным различием в CD-портрете было значительно
более низкое содержание клеток с экспрессией CD90 в культуре СЭК-ЖТ. Гистохимический анализ показал
отсутствие клеток, окрашиваемых масляным красным (тест на адипоцитарную дифференцировку),
в обеих культурах и в 10 раз большее количество клеток, реагирующих со щелочной фосфатазой
(тест на остеоцитарную дифференцировку), в культуре ПК-ЖТ. Иммуноцитохимическое тестирование
выявило одинаково низкое количество клеток, экспрессирующих маркер тяжелой цепи миозина
MAB1628 и гладкомышечного a-актина a-hSMA в обеих культурах. Доля клеток, экспрессирующих белок
щелевых контактов коннексин-43, была значительно выше в культуре, полученной из ПК-ЖТ. Клетки
только этой культуры экспрессировали маркер эпителиальных клеток цитокератин-19. Методом
ОТ-ПЦР в СК из СЭК-ЖТ была обнаружена мРНК гена GATA4. Таким образом, культура ПК-ЖТ богаче
предшественниками эпителиальных и остеогенных клеток, тогда как культура СЭК-ЖТ содержит кардиомиогенные
СК и может рассматриваться как альтернатива ПК-ЖТ в качестве источника СК для кардиотерапии.
Ключевые слова: иммуноцитохимия, иммунофенотипирование, ОТ-ПЦР, GATA4
| Full text
| Back
| Contents
| Main |
|
