МОДУЛЯЦИЯ КОНФОРМАЦИИ СУБФРАГМЕНТА-1 МИОЗИНА (S-1)
И ИНГИБИРОВАНИЕ S-1-АТФазы КАЛЬПОНИНОМ МИДИИ
В.В. Сиренко,1 А.О. Симонян,1 A.B. Добржанская,2 Н.С. Шелудько,2 Ю.С. Боровиков 1,*
1 Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург,
и 2 Институт биологии моря им. A.B. Жирмунского ДВО РАН, Владивосток;
* электронный адрес: boroviko@mail.cytspb.rssi.ru
Роль кальпонина в физиологических процессах гладких мышц, несмотря на многолетнее изучение,
остается во многом непонятной. Несмотря на большое количество экспериментальных данных, вопрос о
роли кальпонина в регуляции сокращения гладких мышц остается открытым до сих пор. Решению вопроса
может помочь изучение кальпониноподобных белков, т. е. белков, имеющих гомологичные последовательность
и структуру, но функционирующих в клетках животных разных таксономических
групп. В настоящей работе мы исследовали недавно идентифицированный кальпонин мидии Crenomytilus
grayanus с мол. массой 40 кДа (СаР-40). Во-первых, проверяли его ингибирующие свойства на актинактивируемую
АТФазу S-1 в присутствии ионов кальция. Во-вторых, с помощью метода поляризационной
флуориметрии на глицеринизированных мышечных волокнах изучали влияние СаР-40 на конформационные
изменения головки миозина при моделировании различных стадий АТФазного цикла. Показано,
что СаР-40 ингибирует активность АТФазы S-1 кролика. Ингибирование достигало 80 % при
соотношении СаР-40 и актина 1 : 2. Кроме того, показано, что СаР-40 модулирует конформацию S-1 таким
образом, что ингибируется формирование сильных форм связывания (стадии А•М и A•M•АДФ)
между S-1 и актином с переводом их в слабую форму связывания. При этом СаР-40 почти не влиял на
слабосвязанное состояние (стадия A•M•АДФ•Фн). Полученные результаты указывают на то, что взаимодействие
СаР-40 с актином приводит к таким конформационным изменениям актина и головки миозина,
которые препятствуют формированию сильной формы связывания S-1 с актином в цикле гидролиза
АТФ.
Ключевые слова: кальпонин мидии, конформационные изменения S-1, поляризация флуоресценции
| Full text
| Back
| Contents
| Main |
|
