МИКРОФЛУОРИМЕТРИЯ СОДЕРЖАНИЯ ДНК В ИНДИВИДУАЛЬНЫХ ХРОМОСОМАХ ЧЕЛОВЕКА С ПОМОЩЬЮ АНАЛИЗАТОРА ИЗОБРАЖЕНИЙ
Н.А. Агафонова, Г.А. Сакута, Ю.М. Розанов, Г.И. Штейн, Б.Н. Кудрявцев
ИНЦ РАН, Санкт-Петербург;
электронный адрес: bn_kudryavtsev@mail.ru
Разработан микрофлуориметричекий метод определения содержания ДНК в индивидуальных хромосомах человека. Метод основан на предварительной идентификации
хромосом с помощью Hoechst 33258, последующем окрашивании хромосом по Фёльгену, используя реактив типа Шиффа бромистый этидий-SO2, и измерении
интенсивности флуоресценции хромосом с помощью анализатора изображений. Метод позволяет определять содержание ДНК в индивидуальных хромосомах с точностью
до 4.5 фг. С помощью разработанного метода измерено содержание ДНК в индивидуальных хромосомах человека, в их p- и q-плечах, а также в гомологичных хромосомах.
Показано, что содержание ДНК в хромосомах нормального кариотипа человека нестабильно и в некоторых хромосомах оно может колебаться в пределах 35-40 фг.
Ключевые слова: хромосомы человека, реакция Фёльгена, реактив типа Шиффа бромистый этидий-SO2, микрофлуориметрия ДНК,
анализатор изображений
| Full text
| Back
| Contents
| Main |
