Цитология  2013  55 (3) : 198–203
СТРУКТУРНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ОРГАНИЗАЦИИ ХРОМАТИНА МЕЖДИСКА 3С6/С7 ПОЛИТЕННЫХ ХРОМОСОМ
DROSOPHILA MELANOGASTER

О.В. Андреенков, Е.И. Волкова, В.Ф. Семешин, И.Ф. Жимулев, С.А. Демаков

Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск;
электронный адрес: demakov@mcb.nsc.ru

Представлены результаты исследования механизмов декомпактизации хроматина междисков политенных хромосом дрозофилы. На примере междиска 3C6/C7 Х-хромосомы изучена способность различных последовательностей ДНК формировать междиск в новом генетическом окружении. Сайт-специфичная FLP-рекомбинация между двумя транспозонами, содержащими FRT-сайты, позволяет внедрять конкретные фрагменты ДНК из известных междисков в цитологически хорошо охарактеризованный район с последующим электронно-микроскопическим анализом изменений этого района. С помощью этого подхода было показано, что перемещение фрагмента ДНК длиной 276 пар нуклеотидов (п.н.) из междиска 3С6/С7 в конструкцию pICon(dv) приводит к образованию нового междиска в районе встройки этого транспозона. Данный фрагмент ДНК оказался минимальной известной на сегодняшний день последовательностью, необходимой и достаточной для формирования междиска в новом генетическом окружении. Помимо этого, в транспозон pICon(dv) были интегрированы 3 тандемно повторенных участка ДНК из междиска 3С6/С7 длиной по 900 п.н., включающих фрагмент 276 п.н. Введение дополнительных копий не меняло морфологию образующегося междиска. Показано, что в междисковых последовательностях, перенесенных в составе транспозона в новое генетическое окружение, сохраняются сайты гиперчувствительности к ДНКазе I. Полученные данные позволяют перейти к анализу конкретных факторов (белков, ДНК мотивов), определяющих формирование декомпактного состояния как определенного междиска, так и хромомерной организации интерфазных хромосом дрозофилы в целом.

Ключевые слова:  транспозон, сайт-специфическая рекомбинация, генетическая трансформация, хроматин, междиск, политенные хромосомы


|  Full text  |  Back  |  Contents  |  Main  |