Цитология  2013  55 (1) : 36–44
КЛЕТКИ ГЕПАТОМЫ ЗАЙДЕЛА ПРИ КУЛЬТИВИРОВАНИИ IN VITRO

Н.П. Терюкова,* Г.И. Блинова, В.А. Иванов

Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург;
* электронный адрес: npter@yandex.ru

Настоящее исследование предпринято с целью изучения клеточных механизмов опухолевой прогрессии и метастазирования. В результате эксплантации клеток асцитной гепатомы Зайдела крысы получены две перевиваемые культуры клеток - монослойная (ZH-ad) и суспензионная (ZH-fl), которые отличаются по уровню цитодифференцировки и туморогенности. С помощью опухолеспецифической иммуносыворотки в составе наружных мембран клеток ZH-fl выявлены опухолеассоциированные антигены, синтез которых снижается или подавляется в клетках ZH-ad. Внутрибрюшинное введение крысе 0.5–12·106 клеток ZH-fl приводит к развитию асцитной опухоли и 100%-й гибели животных, тогда как при введении клеток ZH-ad для достижения туморогенного эффекта минимальная доза должна быть увеличена до 20·106. Клоногенный анализ клеток ZH-fl выявил три вида образующихся клонов - неприкрепляющиеся сферы и два типа монослойных клонов, различающихся по пролиферативному потенциалу, форме колоний и клеточному составу. Достигая критического размера, сферические колонии расщепляются с отделением одиночных клеток и островков различных размеров, часть из которых прикрепляется с формированием монослоя. Получены 3 клональные линии клеток: 1C - в результате экспансии сферического клона, 4G и 10Е - из монослойных клонов; установлена туморогенность клеток линии 1С, которые в дозе 107 привели к развитию асцита и 50%-й гибели животных. Представленные результаты свидетельствуют о существовании в составе клеток ZH-fl популяции опухоль-инициирующих клеток, генерирующих сферические клоны - флотирующие многоклеточные островки, которые при культивировании в полной ростовой среде частично дифференцируются и прикрепляются с образованием монослоя.

Ключевые слова:  гепатома, клонирование, опухолеассоциированные антигены, стволовые клетки опухолей, туморогенность


|  Full text  |  Back  |  Contents  |  Main  |