Цитология  2012  54 (7) : 573–579
МОЛЕКУЛЯРНАЯ И ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ИДЕНТИФИКАЦИЯ НАТРИЕВЫХ КАНАЛОВ В КЛЕТКАХ K562

Сударикова А. В.,1,* Васильева И. О.1 Морачевская Е. А.1 Негуляев Ю. А.1,2

1 ФГБУН Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, 2 Кафедра физико-химической биологии клетки С.-Петербургского государственного политехнического университета, Санкт-Петербург;
*электронный адрес: anastasia.sudarikova@gmail.com

В настоящей работе проведена функциональная и молекулярная идентификация потенциалнезависимых натриевых каналов в клетках миелоидной лейкемии человека K562, в частности проверены предположения относительно их принадлежности к семейству DEG/ENaC (дегенерины/эпителиальные натриевые каналы). Методом ОТ-ПЦР в клетках K562 показана экспрессия субъединиц α, β и γ-канала hENaC. С помощью различных вариантов метода патч-кламп изучены биофизические характеристики натриевых каналов, проанализировано действие диуретика амилорида. В натриевом растворе (145 мМ Na+) исследуемые каналы имели проводимость около 12 пСм. Установлено, что они непроницаемы для двухвалентных катионов (Ca2+ и Мg2+) и не блокируются амилоридом. При этом важно отметить, что отсутствие амилорид-чувствительной компоненты показано как на уровне одиночных каналов, так и на уровне интегрального натриевого тока. Полученные результаты позволяют полагать, что амилорид-нечувствительные натриевые каналы в клетках K562 принадлежат к семейству ENaC.

Ключевые слова:  плазматическая мембрана, потенциал-независимые натриевые каналы, амилорид, клетки лейкемии человека, эпителиальные натриевые каналы ENaC


|  Full text  |  Back  |  Contents  |  Main  |