ПОЛУЧЕНИЕ И АНАЛИЗ ЭКЗОСОМ, СЕКРЕТИРУЕМЫХ ЗЛОКАЧЕСТВЕННО ТРАНСФОРМИРОВАННЫМИ КЛЕТКАМИ ЧЕЛОВЕКА В СИСТЕМАХ
IN VITRO
Т.А. Штам,1 С.Н. Нарыжный,1 С.Б. Ланда,1 В.С. Бурдаков,2
Т.О. Артамонова,2 М.В. Филатов 1,*
1 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Петербургский Институт Ядерной физики им. Б.П. Константинова", Гатчина и
2 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Санкт-Петербургский
государственный политехнический университет";
* электронный адрес: fil_53@mail.ru ;
filatov@omrb.pnpi.spb.ru
Экзосомы - природные наночастицы, секретируемые различными клетками и способные нести белковые маркеры и генетическую информацию, таким образом
участвуя в межклеточной коммуникации. Есть серьезные основания полагать, что количественная и качественная характеристика микрочастиц, продуцируемых
клетками различных тканей в норме и при патологии, может дать существенную диагностическую и прогностическую информацию и служить биомаркером
различных заболеваний, включая онкологические. Разработке методов выделения экзосом из клеточных систем in vitro, а также протеомному анализу их состава
посвящена представленная работа. Разработан оригинальный подход повышения продукции экзосом при культивировании злокачественно трансформированных
клеток человека. Полученные результаты позволили нам выявлять экзосомы в образцах конденсированной культуральной среды и контролировать качество
получаемых препаратов экзосом на всех этапах их выделения. Сопоставление электрофореграмм экзосомальных белков, полученных из препаратов экзосом
клеточных культур различного тканевого происхождения, демонстрирует различия в белковом профиле. Методами двумерного разделения белков экзосом,
выделенных из клеточных культур глиального происхождения, с последующей денситометрией и идентификацией с помощью масс-спектрометрии охарактеризовано
более 30 экзосомальных белков, что позволило выявить специфические экзосомальные белковые маркеры, характерные для злокачественных опухолей этой
этиологии.
Ключевые слова: экзосомы, протеомный анализ, лазерная корреляционная спектроскопия
| Full text
| Back
| Contents
| Main |
|
