ОСОБЕННОСТИ ЦИТОМЕТРИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ДНК В ЯДРЕ
Ю.Г. Пичугин,2,3 К.А. Семьянов,4 А.В.Чернышев,2,3
И.Г. Пальчикова,3,5 Л.В. Омельянчук,1,3,* В.П. Мальцев 2,3
1 Институт Химической Биологии и Фундаментальной Медицины СОРАН, 2 Институт Химической Кинетики и Горения СОРАН,
3 Новосибирский государственный Университет, 4 Институт Цитологии и Генетика СО РАН, и
5 Конструкторско-технологический институт научного приборостроения СО РАН, Новосибирск;
* электронный адрес: ome@mcb.nsc.ru
В работе предложен новый теоретический подход для анализа гистограмм содержания ДНК, полученных методом проточной цитофотометрии, в клетках
имагинальных дисков Drosophila melanogaster. Расчетная модель дает возможность определения числа клеток в G1, G2(M) и
S фазах клеточного цикла. Показано, что точность измерений количества ДНК в G1 и G2(M) фазах лимитируется точностью аппаратной
установки нуля проточного цитометра. Применение расчетного нуля проточного цитометра и использование делящихся клеток в качестве стандартов содержания
ДНК способны многократно увеличить точность измерений содержания ДНК в ядрах данного вида. В работе также проведен сравнительный анализ погрешностей
различных методов измерения содержания ДНК в ядрах клеток. Для методов проточной флуоресцентной цитометрии, конфокального сканирования и цитофотометрии
ядер, окрашенных по Фельгену, показано, что в настоящее время среднеквадратичные погрешности измерений содержания ДНК лежат в интервале значений,
который считается приемлемым для биологических исследований. (0.02< CV< 0.06).
Ключевые слова: флуоресцентная проточная цитометрия, содержание ДНК, клеточный цикл
| Статья
| Back
| Contents
| Main |
|
