СРАВНИТЕЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НОВЫХ ЛИНИЙ МЕЗЕНХИМНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК, ПОЛУЧЕННЫХ ИЗ ЭМБРИОНАЛЬНЫХ
СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК, КОСТНОГО МОЗГА И КРАЙНЕЙ ПЛОТИ ЧЕЛОВЕКА
Т.А. Крылова, А.М. Кольцова, В.В. Зенин, А.С. Мусорина, Т.К. Яковлева, Г.Г. Полянская 1
Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург;
1 электронный адрес: poljansk@mail.cytspb.rssi.ru
Получены новые неиммортализованные фибробластоподобные клеточные линии человека из разных источников: из эмбриональных стволовых клеток (ЭСК)
(линии SC5-МSC и SC3а-МSC), из костного мозга 5-6-недельного эмбриона (линия FetMSC) и из крайней плоти 3-х летнего ребенка (линия FRSN). Все линии
успешно используются в качестве фидера при культивировании ЭСК человека. Среднее время удвоения клеточных популяций колеблется в зависимости от линии
от 25.5 ч у линии и SC5-МSC до 38.8 ч у линии SC3а-МSC. Кривые роста свидетельствуют об активной пролиферации клеток всех линий. Количественный и
структурный кариотипический анализ показал, что эти линии имеют нормальный кариотип: 46,ХХ (SC5-МSC и SC3а-МSC) и 46, XY (FetMSC и FRSN). Для
определения статуса этих линий провели сравнительный анализ поверхностных маркеров с помощью проточной цитофлуориметрии и выявили экспрессию
поверхностных антигенов, характерных для МСК человека: CD44, CD73, CD90, CD105 и HLA-ABC и отсутствие экспрессии CD34 и HLA-DR. Обнаружили
межлинейные различия по уровню экспрессии маркера CD117(c-kit). Иммунофлуоресцентный и цитофлуориметрический анализ экспрессии поверхностных маркеров
и транскрипционного фактора Oct-4, характерных для ЭСК человека, показал, что во всех 4-х линиях отсутствует экспрессия TRA-1-60 и Oct-4, а по экспрессии
SSEA-4 наблюдаются межлинейные различия, не зависящие от происхождения клеток. Пока неясно, имеют ли обнаруженные межлинейные различия существенное
влияние на функциональный статус мезенхимных стволовых клеток (МСК). С помощью иммунофлуоресцентного анализа в клетках всех линий показана экспрессия
маркеров ранней дифференцировки в производные 3-х зародышевых листков, характеризующих ЭСК, что, возможно, обеспечивает широкие возможности МСК при
репарации разных тканевых повреждений в зависимости от соответствующего микроокружения. Показана способность клеток всех линий направленно
дифференцироваться в адипогенном и остеогенном направлениях.
Ключевые слова: линии мезенхимных стволовых клеток человека, иммунофлуоресцентный анализ, поверхностные клеточные маркеры, кариотип
| Статья
| Back
| Contents
| Main |
|
