ВЫДЕЛЕНИЕ И АНАЛИЗ СОСТАВА ЦИТОЗОЛЬНЫХ БЕЛКОВЫХ КОМПЛЕКСОВ, СОДЕРЖАЩИХ ТРОПОМИОЗИН
Д.Е. Бобков,1 А.А. Айзенштадт,1 И.В.Кропачёва,1 Г.П. Пинаев 1,2
1 Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург и 2 Факультет биомедицинской физики и биоинженерии Санкт-Петербургского государственного
Политехнического университета;
электронный адрес: bobkovde@yandex.ru
При анализе структурных перестроек актинового цитоскелета клеток тропомиозин был обнаружен в цитоплазме в виде частиц или белковых комплексов, не связанных с
актиновыми структурами. Для изучения состава и свойств этих белковых комплексов в настоящей работе разработан метод их выделения из клеток без разрушения структур
цитоскелета. С помощью гель-фильтрации, электрофореза и вестерн-блотинга охарактеризован белковый состав выделенных комплексов, содержащих тропомиозин. Они
представляют собой сложные мультимолекулярные комплексы с мол. массой около 700 кДа. В составе этих комплексов, помимо тропомиозина и актина, методом масс-спектрометрии
идентифицированы белки теплового шока Hsp70 и Hsp90, а также миозин-9. Показано также, что под действием ингибитора деацетилаз трихостатина А, вызывающего в клетках
перестройки актинового цитоскелета, одновременно происходит изменение количества тропомиозиновых частиц и перераспределение тропомиозина между цитозолем и
цитоскелетом. Полученные результаты дают основание предполагать, что данные мультимолекулярные комплексы могут принимать участие в процессах реорганизации системы
актиновых микрофиламентов.
Ключевые слова: тропомиозин, белковые комплексы, актиновый цитоскелет, миозин-9, белки теплового шока
| Статья
| Back
| Contents
| Main |
