РАЗЛИЧИЯ В ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ КУЛЬТИВИРУЕМЫХ КЛЕТОК ЭНДОТЕЛИЯ КРОВЕНОСНЫХ СОСУДОВ ЧЕЛОВЕКА,
ПОЛУЧЕННЫХ ОТ РАЗНЫХ ДОНОРОВ
Н. Н. Склянкина, Н. В. Болдырева, О. Н. Щегловитова
Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Н. Ф. Гамалеи РАМН, Москва;
электронный адрес: scheglovitova@rambler.ru
Эндотелий кровеносных сосудов в организме принимает участие в выполнении многочисленных функций в физиологических условиях и при патологических процессах.
Разработка метода выделения и культивирования клеток эндотелия дала возможность моделировать процессы, происходящие в эндотелии сосудов. В отличие от перевиваемых
культур исследования на первичных культурах клеток приводят к большому разбросу в результатах. В данной работе сравнили культуры, полученные из пуповин от 20 доноров,
по продукции ряда маркеров, частично характеризующих функциональное состояние эндотелия. Обнаружили, что культуры по уровню продукции всех исследованных маркеров
после 3 ч культивирования клеток можно было условно разделить на высоко- и низкопродуцирующие. При анализе цитокинового профиля выявили, что уровень спонтанной
продукции интерлейкина (ИЛ)-1β в группах не меняется при культивировании клеток 24 и 48 ч, тогда как уровни продукции ИЛ-6 и ИЛ-8 увеличивались к 24 и 48 ч, и разница
между группами нивелировалась; увеличение продукции фактора некроза опухоли альфа происходило при культивировании культур только в низкопродуцирующей группе.
Увеличение содержания растворимых Р-селектина и E-селектина в культуральной среде наблюдалось при культиви-ровании только низкопродуцирущих культур, тогда как
увеличение содержания растворимых молекул клеточной адгезии sICAM-1 отмечалось при культивировании высокопродуцирующих культур; увеличение содержания растворимой
молекулы адгезии эндотелия и тромбоцитов sPECAM-1 было выявлено при культивировании как высоко-, так и низкопродуцирующих культур, при этом сохранялась разница в
уровне ее содержания между группами. Содержание в культуральной среде растворимого VE-кадхерина не менялось при культивировании клеток. Уровень нитрита, отражающий
содержание оксида азота, увеличивался в культуральной среде при культивировании всех культур, при этом разница между группами сохранялась; концентрация эндотелина-1
также увеличивалась, однако значения этого маркера в среде отдельных культур были близкими, поэтому не удалось создать группы, отражающие уровни его продукции.
Содержание фактора фон Виллебранда увеличивалось в культуральной среде при культивировании культур обеих групп, однако разница между группами не сохранялась.
Содержание в культуральной среде матриксной металлопротеиназы-1 увеличивалось при культивировании культур. Следовательно, культуры эндотелия разных доноров различаются
по способности продуцировать маркеры функциональной активности и характеризуют особенности доноров клеток. Полученные результаты дают возможность моделировать
процессы, происходящие в эндотелии сосудов, с учетом индивидуальных особенностей культур и позволяют предполагать необходимость более тщательного подхода к оценке
результатов, получаемых на первичной культуре эндотелия.
Ключевые слова: культура эндотелия пупочной вены, цитокины, растворимые МКА, NO, эндотелин-1, фактор фон Виллебранда, ММП-1
| Pdf
| Back
| Contents
| Main |