2011  53 (4) : 367–377
ФРАГМЕНТАЦИЯ ХРОМАТИНА КОДИРУЮЩИХ ОБЛАСТЕЙ TRP-ДИОКСИГЕНАЗНОГО (to) И TYR-АМИНОТРАНСФЕРАЗНОГО (tat) ГЕНОВ В АКТИВНОМ И РЕПРЕССИРОВАННОМ СОСТОЯНИЯХ МИКРОКОККОВОЙ НУКЛЕАЗОЙ

Т. Н. Прияткина,1 Е. Ю. Павлова, Н. Е. Войнова, Е. В. Дефорж

С.-Петербургский государственный университет;
1 электронный адрес: tpriyatkina@mail.ru

С использованием метода блот-гибридизации исследовали характер фрагментации микрококковой нуклеазой (МНазой) ДНК кодирующих областей генов trp-диоксигеназы (to) и tyr-аминотрансферазы (tat) в активном (в ядрах клеток печени крыс) и репрессированном (в ядрах мозга) состояниях. Показано, что в ядрах печени на всем протяжении кодирующих областей генов to и tat не обнаруживается нуклеосомных устройств - нуклеазорезистентных компактных частиц, разделенных сегментами свободной ДНК (межнуклеосомными линкерами). В широком диапазоне концентраций фермента преимущественно продуцируются два класса фрагментов: близкие по длине полноразмерным to- и tat-единицам транскрипции (19 000 и 11 000 п. н. соответственно) и их крупные (от 1500 п. н.) сегменты различной протяженности. Сохранение в гидролизатах фрагментов обоих классов в лимите переваривания общей ДНК в составе ядер, когда МНазные разрывы реализуются практически во всех потенциально доступных сайтах хроматина, показывает, что они происходят из двух разных видов единиц транскрипции to и tat, представленных в ядрах печени. Одни из них не содержат доступных для МНазы сайтов на всем своем протяжении, тогда как в других резистентные области чередуются с редкими, нерегулярно располагающимися МНазочувствительными участками. Мы предполагаем, что устойчивость ДНК к МНазе на всем протяжении кодирующих областей присуща to- и tat-копиям в компетентном к транскрипции состоянии, но не транскрибируемым в данный момент времени. При транскрипции возникают МНазочувствитель-ные зоны, которые, возможно, фланкируют элонгирующие РНК-полимеразы.

Ключевые слова:  хроматин дерепрессированных генов: компетентность к транскрипции; нуклеазная фрагментация, ремоделирование нуклеосом


|  Pdf   |  Back   |  Contents   |  Main  |