ПОЛУЧЕНИЕ ИНДУЦИРОВАННЫХ ПЛЮРИПОТЕНТНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК КРЫСЫ: АНАЛИЗ УСЛОВИЙ РЕПРОГРАММИРОВАНИЯ И КУЛЬТИВИРОВАНИЯ
М.А. Лисковых,1 И.А. Чуйкин,2 А. Ранян,2 Д.А. Сафина,1 Е.Н. Толкунова,1
Ю.М . Минин,3 Н.С. Жданова,3 П.А. Дыбан,4 Дж. Маллинс,5 Е.И. Костылева,1
Е.В. Чихиржина,1 М. Бадер,2 Н. Аленина,2 А.Н. Томилин 1
1 Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, Россия, 2 Центр молекулярной медицины имени Макса Дельбрюка, Берлин, Германия,
3 Институт цитологии и генетики СО РАН, Новосибирск, Россия, 4 Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург, Россия,
5 Центр кардиоваскулярных исследований, Эдинбург, Великобритания;
1 электронный адрес: liskovykh@mail.ru
Крыса, в сравнении с мышью, представляет собой значительно более удобную животную модель для изучения актуальных вопросов физиологии, фармакологии,
трансплантологии, иммунологии, канцерогенеза, старения, и сердечно-сосудистых заболеваний. Получение индуцированных плюрипотентных стволовых (иПС) клеток крысы, как
альтернативы эмбриональным стволовым (ЭС) клеткам, открывает новые возможности изучения функции генов, отработки новых протоколов дифференцировки и заместительной
клеточной терапии на крысиной модели. В данной работе мы представляем усовершенствованный протокол получения иПС клеток крысы, основанный на лентивирусном введении
репрограммирующих факторов с их последующим удалением из генома, а также на использовании бессывороточных сред и химических ингибиторов MEK и GSK. Мы
представляем сравнение различных условий получения и культивирования иПС клеток, анализ их кариотипа, а также доказательства плюрипотентного статуса полученных нами иПС
клеток. Полученные данные могут помочь в дальнейших исследованиях, нацеленных как на проведение генного нокаута на крысах, так и на отработку на этих животных подходов
к тканезаместительной терапии.
Ключевые слова: индуцированные плюрипотентные стволовые клетки, крыса, репрограммирование
| Back
| Contents
| Main |
|
