ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ТРАНСКРИПЦИОННОГО ФАКТОРА CDX2 С БЕЛКОМ DDX5
М.А. Лисковых, А.П. Давыдов-Синицын, Е.В. Мариловцева, А.Н. Томилин,1 Е.Н .Толкунова
Институт Цитологии РАН, Санкт-Петербург;
1 электронный адрес: antom@mail.cytspb.rssi.ru
Данные, полученные в результате дигибридного скрининга, позволили нам выявить белок р68 (DDX5), возможно являющийся белковым партнёром, взаимодействующим с CDX2.
Настоящая работа посвящена подтверждению этого взаимодействия. Показана колокализация данных белков в ядрах клеток линии карциномы толстого кишечника Сасо2 и эпителия
ворсинок. С использованием метода GST pull-down мы выявили DDX5 в составе комплекса с CDX2. В ходе исследования влияния взаимодействия CDX2 и DDX5 на
β-катенин-опосредованную регуляцию транскрипции нами отмечено, что CDX2 в исследованных клеточных линиях 293Т, T98G и U2OS выступает в роли активатора экспрессии
люциферазы. Причём, в клеточных линиях T98G и U2OS наблюдается частичное снятие усиливающего эффекта β-катенина на экспрессию при его взаимодействии с CDX2.
DDX5 во всех трёх клеточных системах является слабым репрессором как сам по себе, так и совместно с CDX2 и β-катенином. Что касается влияния на промотор гена циклина
D1, мы обнаружили, что в разном клеточном контексте CDX2 может или снижать уровень экспрессии белка с промотора гена циклина D1 (в клетках U2OS), или повышать его (в клетках
T98G). При этом фактор роста тромбоцитов (PDGF) снижает эффективность действия Cdx2, как в роли репрессора, так и в роли активатора. При совместной трансфекции клеток T98G
плазмидами, обеспечивающими экспрессию CDX2 и DDX5, репрессирующее действие DDX5 нивелировалось активирующим действием CDX2. В линиях клеток T98G и U2OS нативный
DDX5 выступает в роли слабого репрессора активности промотора гена циклина D1; действие PDGF не влияло на активность DDX5.
Ключевые слова: эпителий кишечника, транскрипционный фактор Cdx2, РНК-хеликаза Ddx5, злокачественная трансформация, регуляция транскрипции
| Back
| Contents
| Main |
