| 2010, Том 52, № 9, c. 760-769 |
Иммунофлуоресцентным методом показано, что аутоиммунные сыворотки М68 и К43 связываются с интерфазными ядрами и митотическими хромосомами клеток культуры СПЭВ. Методом иммуноблотинга в сыворотке М68 обнаружены антитела к белку с мол. массой 50 кДа, а в сыворотке К43-анти-тела к полипептиду с мол. массой 38 кДа. В ядерном белковом матриксе антитела к белку с мол. массой 38 кДа окрашивают только периферию ядрышек интерфазных клеток, а антитела к белку с мол. массой 50 кДа окрашивают как периферию ядрышек, так и все ядро. Это говорит о том, что из всех компонентов ядерного матрикса (ламина, внутренняя белковая сеть, остаточное ядрышко) белок с мол. массой 38 кДа входит в состав периферии остаточных ядрышек, а полипептид с мол. массой 50 кДа не только входит в состав периферии остаточных ядрышек, но и участвует в образовании ядерной белковой сети. Данные белки в интерфазных клетках in situ локализовались в ядре, причем один из них (50 кДа) в виде небольших четко очерченных гранул, а второй (38 кДа) в виде ярких мелких гранул на фоне диффузно окрашенного ядра. Оба белка выявляются также по периферии ядрышек в виде сплошного кольца. Во время митоза белок с мол. массой 50 кДа выявляется на периферии хромосом в виде чехла или муфты, а белок с мол. массой 38 кДа располагается на митотических хромосомах в виде отдельных фрагментов и гранул вокруг них. В условиях искусственной деконденсации хромосом антитела к обоим белкам окрашивают интерфазные ядра диффузно, а в митотических клетках локализуются на поверхности набухших хромосом. Белок с мол. массой 50 кДа сохраняет прочную связь с хромосомами как в норме и при гипотонической деконденсации, так и при последующей реконденсации в изотонической среде, в то время как белок с мол. массой 38 кДа при реконденсации частично теряет связь с хромосомой, появляясь в цитоплазме в виде гранул. Из представленных данных можно сделать вывод о том, что белки ядерного матрикса переносятся периферическим хромосомным материалом и могут иметь различную степень ассоциации с периферией хромосом, так же как и основные белки ядрышка, такие как фибрилларин, В-23, нуклеолин и некоторые неядрышковые белки ядерного матрикса. Ключевые слова: гипотония, иммунохимия, митоз, хромосома, ядерно-белковый матрикс, ядрышко |