| 2010, Том 52, № 6, c. 466-476 |
Методом иммунофлуоресцентной конфокальной микроскопии изучали ацетилирование микротрубочек (МТ) в ходе эндоцитоза рецептора эпидермального фактора роста, c-ErbB1. Обнаружено, что стимуляция эндоцитоза c-ErbB1 при образовании его комплекса с эпидермальным фактором роста (ЭФР) приводит к постепенному увеличению ацетилирования МТ, достигающего максимума через 60-90 мин и затем снижающегося до контрольного уровня. Рецепторсодержащие эндосомы при этом постепенно укрупняются и перераспределяются в околоядерную область. Через 60-90 мин крупные эндосомы формируют плотные кластеры вокруг центра организации микротрубочек (ЦОМТ). Другой нативный лиганд c-ErbB1, трансформирующий фактор роста-α (ТФР-α), в отличие от ЭФР вызывающий рециклирование рецептора, также инициирует волну ацетилирования, но эффект выражен слабее и эндосомы в этом случае не укрупняются и не формируют плотных скоплений в области ЦОМТ. Обработка клеток ингибитором деацетилаз трихостатином А (TSA) приводит к полному ацетилированию всей популяции МТ в клетке. В этих условиях транслокация эндосом, содержащих комплекс ErbB1 с ЭФР, носит такой же характер, как и в не обработанных ингибитором клетках, однако размер эндосом не увеличивается по мере их перемещения в околоядерную область. Ацетилирование особенно ярко выражено на сильно искривленных участках МТ, располагающихся ближе к ЦОМТ и формирующих там плотную спутанную сеть, тогда как периферические плюс-концы МТ в основном прямые и не модифицированы. Полученные данные позволяют предполагать, что ацетилирование МТ не является критичным для преимущественного связывания динеина или кинезина и соответственно для организации перемещения эндосом в определенном направлении, а связано со стабилизацией определенного пула МТ, которые поддерживают гомотипическое слияние эндосом на ранних стадиях их созревания. Ключевые слова: эндоцитоз, c-ErbB1, ЭФР, ТФР-α, эндосомы, микротрубочки, ацетилирование, TSA |