2010, Том 52, № 4, c. 349-353

ИНТЕГРАЛЬНЫЙ МЕТОД ИЗМЕРЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА ДНК В КЛЕТКЕ C ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ЦИФРОВОЙ МИКРОФОТОГРАФИИ Л. В. Омельянчук,1 В. Ф. Семешин,1 А. Л. Алексеева,1,2 И. Г. Пальчикова,3 И. Ф. Жимулев 1 1 Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Новосибирск, 1 Новосибирский государственный университет и 3 Конструкторско-технологический институт научного приборостроения СО РАН, Новосибирск; электронный адрес: ome@bionet.nsc.ru Апробирован метод оценки количества ДНК в ядрах, окрашенных по Фёльгену, с помощью цифровых изображений на CCD-камерах. Измерения проводили в монохромном режиме (650 × 514 пикселей) с длиной световой волны 551 нм. С помощью ступенчатого ослабителя показана линейная зависимость сигнала элементов фотоматрицы от количества падающего света. Предложен способ учета бликов оптики, найдены оптимальные параметры настройки микроскопа и камеры для денситометрических измерений. Показано, что вклад в проводимые измерения собственной флуоресценции ядер, окрашенных по Фёльгену, пренебрежимо мал. Денситометрическое измерение количества ДНК в клетках крови четырех видов позвоночных (Gallus domesticus, Danio rerio, Homo sapiens и Rana arvalis) показывает хорошее соответствие с данными литературы (http://www.genomesize.com). Точность полученных измерений сравнима с точностью данных, полученных ранее с помощью других методов цитофотометрии. Поскольку в настоящее время технические параметры CCD-камер постоянно улучшаются, предлагаемый метод количественного определения ДНК ядер имеет перспективу для развития. Ключевые слова:  цитофотометрия ДНК, цифровые изображения, пиксель, фотоматрица, клетки крови | Pdf | Back | Contents | Main |