| 2010, Том 52, № 2, c. 184-190 |
Охарактеризована роль JAK/STAT сигнального пути в пролиферации клеток хронической лейкемии К562. Активность белков семейства STAT (транскрипционных факторов) оценивали по количеству фосфорилированных по тирозину форм STAT3 и STAT5. В пролиферирующих культурах клеток K562 выявлен высокий уровень фосфорилирования STAT3 и STAT5. Для выяснения роли этих белков в поддержании пролиферативного статуса культуры K562 использовали ингибиторы JAK/STAT-пути: AG-490, ингибирующий киназу JAK2 и JAK3 в разных клетках, и WHI-P131 - ингибитор, специфичный для киназы JAK3. Установлено, что длительное (48 ч) ведение клеточных культур в присутствии использованных ингибиторов не сопровождается гибелью клеток. Обнаружено, что WHI-P131 снижает уровень фосфорилирования STAT5 (но не STAT3) и останавливает рост культур K562. Цитометрический анализ распределения клеток по фазам клеточного цикла в культуре K562, растущей в присутствии WHI-P131 (30-100 мкМ), показал дозозависимое снижение доли клеток в фазах G1 и S и отсутствие существенных изменений в структуре клеточного цикла при наличии в среде культивирования AG-490 (25- 50 мкМ). Полученные данные указывают на ключевую роль STAT5 в поддержании пролиферативного статуса клеток K562 и выявляют специфику ингибирующего действия WHI-P131: в отличие от других, ранее испытанных ингибиторов киназ семейства JAK, которые стимулируют апоптотическую гибель клеток, WHI-P131 останавливает клеточный рост, задерживая клетки на границе постсинтетических фаз G2/M клеточного цикла. Ключевые слова: JAK/STAT-сигнализация, STAT3, STAT5, WHI-P131, AG-490, пролиферация, клетки K562 |