2010, Том 52, № 12, c. 983–989
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ К ДЕЙСТВИЮ ЕСТЕСТВЕННЫХ КИЛЛЕРОВ ЗАВИСИТ ОТ ЦЕЛОСТНОСТИ ЛИПИДНЫХ РАФТОВ В МЕМБРАНЕ ТРАНСФОРМИРОВАННЫХ КЛЕТОК-МИШЕНЕЙ

Н. А. Филатова, В. И. Чубинский-Надеждин, В. А. Иванов, Е. А. Морачевская 1

Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург;
1 электронный адрес: elenmo@mail.cytspb.rssi.ru

Работа посвящена анализу роли богатых холестерином липидных микродоменов (рафтов) в реализации клеточных механизмов естественного иммунитета и противоопухолевой защиты. Исследовали литическое действие естественных киллерных клеток (ЕКК) в зависимости от содержания холестерина и состояния липидных рафтов в плазматической мембране трансформированных клеток. В данной работе мишенями являлись клетки эритролейкемии человека K562. Для частичной экстракции холестерина использовали метил-бета-циклодекстрин (МбЦД) - циклический олигосахарид, избирательно связывающий стеролы. Снижение уровня холестерина после инкубации клеток с МбЦД подтверждали энзиматическим методом. С помощью 3Н-уридинового теста оценивали активность ЕКК (спленоцитов мыши) в отношении культивируемых клеток K562 в различных условиях, в том числе после их инкубации с МбЦД или альфа-циклодекстрином (аЦД) - структурным аналогом МбЦД, не связывающим стеролы. Полученные результаты свидетельствуют о том, что снижение содержания холестерина в клетках K562 (после обработки МбЦД в концентрации 2.5 или 5 мМ) приводит к полной утрате их чувствительности к литическому действию ЕКК. Скорее всего, это обусловлено нарушением структуры липидных рафтов, целостность которых критически зависит от уровня мембранного холестерина. Сделанные заключения согласуются с данными по визуализации изменений клеточной поверхности, полученными при флуоресцентном мечении ганглиозида GM1 - маркера богатых холестерином липидных микродоменов.

Ключевые слова:  плазматическая мембрана, естественные киллеры, холестерин, липидные рафты, клетки K562, метил-бета-циклодекстрин, альфа-циклодекстрин


Pdf | Back | Contents | Main |