| 2010, Том 52, № 11, c. 955–959 |
Бензтиазольный краситель тиофлавин Т (ThT) широко и эффективно используется для диагностики возникновения амилоидных и амилоидо-подобных фибрилл in vivo и in vitro. Однако механизмы специфического связывания красителя с амилоидными фибриллами и причины существенного возрастания квантового выхода флуоресценции ThT при его инкорпорации в амилоидные фибриллы до сих пор недостаточно изучены. Результаты, полученные в настоящей работе, позволили заключить, что ThT встраивается в амилоидные фибриллы в мономерной форме, а предположения об образовании красителем димеров, эксимеров или мицелл необоснованны. Было показано, что увеличение квантового выхода флуоресценции ThT при встраивании красителя в амилоидные фибриллы обусловлено ограничением торсионных колебаний бензтиазольного и аминобензольного колец друг относительно друга. Методом равновесного микродиализа показано существование двух мод связывания ThT с фибриллами на основе инсулина. Определены количество мест связывания и константы связывания ThT с каждой из этих мод. Ключевые слова: тиофлавин Т, амилоидные фибриллы, квантовый выход, поглощение, флуоресценция, инсулин |