2010, Том 52, № 11, c. 960–966

ЧАСТИЧНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЦЕРУЛОПЛАЗМИНА КРЫСЫ, ВЫДЕЛЕННОГО ИЗ СЫВОРОТКИ КРОВИ ЖИВОТНЫХ, ПОЛУЧАВШИХ С ПИЩЕЙ СОЛИ СЕРЕБРА А. Н. Скворцов,1, 2 Е. Ю. Ильичева,2 Е. А. Затуловский,2 А. Н. Савельев,1 Н. В. Цымбаленко,3 М. М. Шавловский,3 Л. В. Пучкова 2, 3 1 Институт цитологии РАН, 2 С.-Петербургский государственный политехнический университет и 3 Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург; 1 электронный адрес: skvor@mail.cytspb.rssi.ru, colbug@mail.ru Абиогенные ионы Ag(I) благодаря сходству электронной структуры с ионами меди (I) способны конкурировать с Cu(I) за связывание с белками, транспортирующими медь из внеклеточного пространства к местам формирования купроэнзимов в клетке. У животных, получающих с кормом соли серебра, развивается дефицит внеклеточной меди, ассоциированной с церулоплазмином (ЦП), основным медьпереносящим белком сыворотки крови позвоночных. В работе представлены результаты изучения биохимических и физико-химических свойств ЦП сыворотки крови крыс, в течение 4 нед получавших с пищей AgCl (Ag-крысы). Методом ионообменной хроматографии из сыворотки крови Ag-крыс получен набор фракций ЦП (Ag-ЦП), элюированных ступенчатым градиентом NaCl. Для каждой фракции методами прямого определения ферментативной активности в геле оценена оксидазная и ферроксидазная активность и измерена кинетическим методом каталитическая активность в реакции окисления специфического хромогенного субстрата для холо-ЦП. Молекулярная масса, относительная электрофоретическая подвижность и соотношение апо- и холо-форм Ag-ЦП установлены методом иммуноблотинга. Продемонстрировано, что препараты Ag-ЦП не содержат продуктов спонтанной ограниченной протеолитиче-ской деградации, характерных для препаратов холо-ЦП. Фракции Ag-ЦП сопоставлены по оптическим спектральным свойствам, третичной структуре, устойчивости к тепловой денатурации, а также содержанию ионов меди и серебра с холо-ЦП сыворотки крови интактных крыс. Показано, что препарат Ag-ЦП содержит примерно 1-2 % ЦП, ферментативные и спектральные характеристики которого совпадают с холо-ЦП. В препарате Ag-ЦП соотношение [Ag] : [Cu] соответствует примерно 4 : 1. По данным кругового дихроизма и дифференциальной сканирующей калориметрии, третичная структура большинства молекул в Ag-ЦП нарушена, что, возможно, повышает их устойчивость к спонтанной ограниченной протеолитической деградации. Ключевые слова:  метаболизм меди, церулоплазмин, транспорт Cu(I)/Ag(I), Ag-церулоплазмин, ионообменная хроматография, круговой дихроизм, сканирующая калориметрия | Pdf | Back | Contents | Main |