2010, Том 52, № 10, c. 863–868 |
Известно, что экспрессия гетерологичных генов в клетках микроорганизмов может оказывать негативное влияние на клетку хозяина. Исходя из этого при использовании микроорганизмов для производства рекомбинантных белков необходимо иметь представление о том, как именно ведет себя чужеродный белок в клетке. В данной работе нами был получен модифицированный ген IFNG быка, который кодирует структуру интерферона, несущего делецию 10 аминокислот на С-конце, а также генетические конструкции, обеспечивающие экспрессию нативного и модифицированного генов IFNG быка совместно с геном GFP в клетках дрожжей Pichia pastoris. При помощи химерных белков ИФН-γ/GFP и ИФН-γ(Δ10)/GFP мы показали, что сигнал ядерной локализации ИФН-γ быка выполняет свою функцию в клетках дрожжей, тогда как его отсутствие приводит к тому, что гетерологичный продукт остается в цитоплазме. Ключевые слова: рекомбинантные белки, гамма-интерферон быка, сигнал ядерной локализации |