| 2010, Том 52, № 1, c. 5-11 |
Длительная адаптация микроспоридий, обширной группы родственных грибам одноклеточных микроорганизмов, к внутриклеточному паразитизму привела к чрезвычайной минимизации функционального аппарата клетки и потере большинства органелл. Структурный анализ секреторного аппарата микроспоридий рода Paranosema показал, что комплекс Гольджи (КГ) паразитов представлен разветвленной сетью тубул, соединяющих эндоплазматический ретикулум (ЭР) с плазматической мембраной и формирующейся полярной трубкой, но лишенной транспортных везикул. Изолированные везикулы не удалось обнаружить даже при использовании ультрабыстрой криофиксации структур клетки под высоким давлением и применении ингибиторов их слияния (раздевания). При этом в геноме паразитов обнаружен целый ряд генов, традиционно вовлеченных в процессы везикулярного транспорта. В настоящей работе проведен анализ ОТ-ПЦР содержания мРНК транскриптов шести генов везикулярного транспорта, кодирующих (β- и β'-субъединицы коатомерного комплекса COPI, Sec13- и Sec31-субъединиц СОРII синтаксин-подобный белок семейства SFT и SNARE-белок синаптобревин в стадиях внутриклеточного развития микроспоридии P. locustae. Для всех изученных генов уровень экспрессии соизмерим с наблюдаемым уровнем гена альтернативной оксидазы - фермента, вовлеченного в центральный метаболизм паразита. Поликлональные антитела, полученные против рекомбинантной Sес13-субъсдиницы СОРII, экспрессированной в Escherichia coli, показали накопление белка в стадиях внутриклеточного развития и спорах паразита, а также его связь с мембранами. Присутствие компонентов системы везикулярного транспорта в авезикулярных клетках микроспоридий требует дальнейшего функционального анализа. Ключевые слова: микроспоридии, везикулярный транспорт, экспрессия генов |