ИССЛЕДОВАНИЕ ЯДЕРНЫХ БЕЛКОВЫХ КОМПЛЕКСОВ α-АКТИНИНА-4 МЕТОДАМИ ДВУМЕРНОГО ЭЛЕКТРОФОРЕЗА И МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ
М. Г. Хотин,1,* Л. В. Туроверова,1 Е. П. Подольская,2 И. А. Краснов,2
А. В. Соловьева,1 В. Ю. Аксенова,1 К.-Э. Магнуссон,3 Г. П. Пинаев,1 Д. Г. Тентлер 1
1 Институт цитологии РАН, 2 Институт аналитического приборостроения РАН, Санкт-Петербург, и
3 Отдел клинической и экспериментальной медицины Линчепингского университета, Швеция;
* электронный адрес: h_mg@mail.ru
Актинсвязывающий белок α-актинин-4 принадлежит к спектриновому суперсемейству и имеет как цитоплазматическую, так и ядерную локализацию.
Однако неясно, какие функции α-актинин-4 выполняет в ядре. В данном исследовании проанализирован состав белковых комплексов, содержащих
α-актинин-4 в ядре клеток А431. Методом двумерного электрофореза определено, что ядерные комплексы, содержащие α-актинин-4, состоят примерно
из 50 белков. Проведен масс-спектрометрический анализ мажорных белков этих комплексов. Идентифицированы β-актин, α- и β-тубулины,
рибонуклеопротеин А2/В1 (регулирует сплайсинг и ассоциирован в ядре с β-актином), пероксиредоксин-1 (участвует в защите клетки от окислительного
стресса) и D-3-фосфоглицериндегидрогеназа (гликолитический энзим). Обнаружение этих белков в комплексе с α-актинином-4 в ядре позволяет предположить
его участие в процессах транскрипции и сплайсинга. Методом тандемной масс-спектрометрии подтверждено наличие β-актина в исследуемых комплексах.
Методом иммунопреципитации ядерных белков с антителами к α-тубулину подтверждено существование α-тубулина и α-актинина-4 в одном
белковом комплексе. Ядерный α-актинин-4 представлен полноразмерной (105 кДа) и двумя укороченными (75 и 65 кДа) изоформами, тогда как в ядерном
комплексе с α-тубулином присутствуют только две укороченные изоформы. Это свидетельствует о том, что α-актинин-4 входит в состав нескольких
различных ядерных комплексов, которые, вероятно, выполняют различные функции.
Ключевые слова: α-актинин-4, масс-спектрометрия
| Pdf |
Back |
Contents |
Main |
|
