НОВЫЕ ЛИНИИ ЭМБРИОНАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА C612 И С910
И. В. Кожухарова,1 И. И. Фридлянская,1 З. В. Ковалева,1 Н. А. Пуговкина,1
Л. Л. Алексеенко,2 В. В. Зенин,1 К. М. Иванцов,2 О. К. Леонтьева,2 Т. М. Гринчук,1
Н. Н. Никольский 1, *
1 Институт цитологии РАН и 2 Международный центр репродуктивной медицины, Санкт-Петербург;
* электронный адрес: Nikolsky@mail.cytspb.rssi.ru
Новые линии эмбриональных стволовых клеток (ЭСК) человека C612 и C910 получены из бласто-цист на стадии вылупления. Клетки культивировали
в среде mTeSR™ без добавок на фидерном слое эмбриональных мышиных фибробластов, обработанных митомицином С. Клетки охарактеризованы по
маркерам плюрипотентности: щелочной фосфатазы, Oct3/4, SEEA-4, Nanog и Rex1. Методом проточной цитофлуориметрии выявлены экспрессия таких
маркеров, как CD90, CD117, и отсутствие или слабая экспрессия CD13, CD34, CD45, CD130, HLA класса I и HLA класса II, что является характерной
особенностью ЭСК человека. Анализ структуры кариотипа метафазных пластинок проводили с применением дифференциальной окраски хромосом на
G-диски. Кариологический анализ выявил наличие клеток с нормальным кариотипом как по числу хромосом, так и по их структуре. Клетки исследованных
линий являются плюрипотентными, поскольку способны дифференцироваться во все три зародышевых листка, что было показано с помощью
специфических антител к нестину, виментину, кератину (маркерам эктодермы), б-фетопротеину (маркеру энтодермы), мышечному б-актинину (маркеру
мезодермы). Таким образом, полученные линии обладают всеми свойствами, присущими ЭСК человека, и могут быть использованы при решении как
фундаментальных, так и практических задач, в частности возможности их применения в заместительной терапии.
Ключевые слова: эмбриональные стволовые клетки человека, клеточные линии, иммуноцитохимия, плюрипотентность,
дифференцировка стволовых клеток
| Pdf |
Back |
Contents |
Main |
|
