FISH-АНАЛИЗ РЕГИОНАЛЬНОЙ РЕПЛИКАЦИИ ГОМОЛОГИЧНЫХ ХРОМОСОМ В ГИБРИДАХ МЕЖДУ ЭМБРИОНАЛЬНЫМИ СТВОЛОВЫМИ
И СОМАТИЧЕСКИМИ КЛЕТКАМИ
О. Л. Подрядчикова, И. Е. Пристяжнюк, Н. М. Матвеева, О. Л. Серов
Институт цитологии и генетики СО РАН, Новосибирск;
электронный адрес: serov@bionet.nsc.ru
Работа посвящена анализу с помощью гибридизации in situ региональной репликации гомологов хромосом 1, 3 и 6 в гибридных клетках,
полученных слиянием эмбриональных стволовых клеток (ЭСК) с соматическими клетками. Показано, что в гибридных клетках с около-диплоидным
набором хромосом родительские гомологи реплицируются синхронно в 70-75 % анализируемых клеток, подобно тому как это происходит в диплоидных
ЭСК и фибробластах. В гибридных клетках с околотриплоидным набором хромосом уровень выявляемой асинхронной репликации гомологов повышался
до 46-57 %. Однако это верно для клеток c тремя копиями тестируемой хромосомы, тогда как в триплоидных клетках, содержащих две копии
анализируемых хромосом, уровень синхронности гомологов близок к таковому диплоидных клеток. В гибридных клетках с околотетраплоидным набором
хромосом уровень асинхронной репликации наблюдался более чем в 50 % клеток, что сопоставимо с уровнем асинхронности в тетраплоид-ных ЭСК и
фибробластах. Таким образом, в гибридных клетках с числом копий индивидуальной хромосомы не более двух наблюдалась синхронная репликация
гомологов, первоначально имевших различные уровни дифференцировки и параметры репликации. Однако информативность метода гибридизации
in situ на интерфазных ядрах существенно меняется с повышением числа копий индивидуальных хромосом и тем самым ограничивает
возможности использования такого подхода для оценки синхронности репликации гомологов в гибридных клетках.
Ключевые слова: репликация, гибридизация in situ, гибридные клетки, интерфазные ядра, асинхронная репликация, плоидность,
эмбриональные стволовые клетки, фибробласты
| Pdf |
Back |
Contents |
Main |
