АНАЛИЗ ВЛИЯНИЯ ТИРФОСТИНА AG1478 НА ПОВЕДЕНИЕ ИНТЕРНАЛИЗОВАННОГО РЕЦЕПТОРА ЭФР НА РАЗНЫХ СТАДИЯХ ЭНДОЦИТОЗА
К. А. Кондратов,1 А. Л. Чернорудский,1, 2 А. П. Амосова,1
Е. С. Корнилова 1, 3
1 Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, и 2 Нижегородская государственная медицинская академия;
3 электронный адрес: elena.kornilova@gmail.com
В настоящей работе было проанализировано влияние тирфостина AG1478, специфического ингибитора рецепторной тирозинкиназы, на динамику
поведения интернализованного рецептора на разных сроках после стимуляции эндоцитоза. Оказалось, что добавление тирфостина через 30 мин после
стимуляции эндоцитоза приводит к рециклированию значительной части 125I-ЭФР на поверхность, причем на более поздних сроках эта доля
уменьшается. Рециклировавшие под действием тирфостина комплексы, однако, не диссоциируют, возможно потому, что способность AG1478 инициировать
олигомеризацию рецепторов в отсутствие лигандов может влиять на константы диссоциации. Оказалось, что только часть рецепторов, локализованных в
ранних эндосомах, способна рециклировать при подавлении ТК. Добавление ингибитора через 30 и 60 мин после стимуляции эндоцитоза приводит к
подавлению деградации меченого ЭФР, при этом на ранних сроках интернализованные ЭФР-рецепторные комплексы блокируются в основном в РЭ,
тогда как на поздних происходило их накопление в не полностью созревших ПЭ. Эти данные свидетельствуют в пользу существования поздней стадии
эндоцитоза, прохождение которой зависит от ТК рецептора. Кроме того, добавление тирфостина через 90 мин приводит не к замедлению, а к ускорению
деградации, что говорит о существовании механизмов, обеспечивающих временное окно, в течение которого рецепторная ТК может осуществлять функции,
не связанные напрямую с эндоцитозом.
Ключевые слова: рецептор ЭФР, AG1478, тирозинкиназа, эндоцитоз, интернализация, рециклирование, компартментализация,
ранние и поздние эндосомы, лизосомы, деградация, градиент Перколла
| Pdf |
Back |
Contents |
Main |
