МОРФОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЦИТОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ СПЛЕНОЦИТОВ КРЫС И МЫШЕЙ НА МОНОСЛОЙНЫЕ КУЛЬТУРЫ
КЛЕТОК ГЕПАТОМ
Н. П. Терюкова,1 О. Н. Погодина, Г. И. Блинова, В. А. Иванов
Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург;
1 электронный адрес: npter@yandex.ru
Исследование было предпринято с целью изучения молекулярных механизмов цитотоксического действия естественных киллерных клеток (ЕКК) на
адгезионные клеточные линии гепатом крыс и мышей. Одна из поставленных нами задач состояла в рассмотрении возможности использования
морфометрического анализа для оценки общей естественной цитотоксической активности эффекторных клеток (ЭК) - спленоцитов - по отношению к
культивируемым клеткам-мишеням (КМ), которые формируют конфлюэнтный монослой. Для изучения вопроса о внутривидовой специфичности во
взаимодействии ЕКК с КМ при постановке цитотоксических тестов с каждой из гепатом в качестве ЭК использовались спленоциты крыс и мышей C3HA.
Мы показали, что клетки двух монослойных культур крысиных гепатом - НТС и Зайдела - являются чувствительными к цитолизу, опосредованному
спленоцитами крыс, но проявляют устойчивость к ЕКК мышей. При этом мягкая предобработка спленоцитов крысы 0.5%-ным параформальдегидом (ПФ),
блокирующая экзоцитоз перфорина и гранзимов из азурофильных гранул ЭК, приводила к практически полному подавлению их цитотоксической активности
только по отношению к клеткам-мишеням гепатомы Зайдела и не влияла на лизис другой мишени - клеток НТС. Из полученных результатов следует, что
спленоциты крыс опосредуют свои литические функции по отношению к тестируемым линиям КМ различными путями: в случае гепатомы НТС эффекторы
индуцируют механизм классического апоптоза через локализованные на поверхности опухолевых клеток "рецепторы смерти", тогда как клетки гепатомы
Зайдела подвергаются "летальному удару" преимущественно посредством перфорин-гранзимного экзоцитоза. Представленные данные доказывают, что
использование морфометрического анализа при проведении цитотоксического теста на адгезионных клеточных культурах позволяет оценивать общий
цитолитический потенциал ЕКК. Монослойные клеточные линии мышиных гепатом - MH-22a и BWTG3 - в условиях нашего опыта проявляют резистентность
к цитотоксическому действию мышиных спленоцитов, но при этом клетки гепатомы MH-22a подвергаются лизису спленоцитами крыс.
Ключевые слова: апоптоз, гепатома, естественные киллерные клетки, лимфоциты, спленоциты, цитотоксическая активность,
эффекторные клетки
Back
Contents
Main
