ИСТОРИЯ ЗАГАДОЧНОЙ АКТИН-СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОТЕАЗЫ, КОТОРАЯ ПРЕВРАТИЛАСЬ В ГРИМЕЛИЗИН, ЧЛЕНА РЕСПЕКТАБЕЛЬНОГО
СЕМЕЙСТВА ТЕРМОЛИЗИНОПОДОБНЫХ МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗ
С. Ю. Хайтлина
Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург;
электронный адрес: skhspb@yahoo.com
Описывается история открытия и исследования бактериальной металлопротеиназы ЕСР32, которая ограниченно расщепляет актин в одном сайте
между Gly42 и Val43, интенсивно вовлеченном в контакт между мономерами актина в полимере. Расщепление приводит к обратимой потере способности
актина к полимеризации. Поэтому актин, расщепленный протеазой ЕСР32, оказался уникальной моделью для изучения механизмов полимеризации актина,
динамики актиновых нитей и влияния на эти процессы актинсвязывающих белков, для выявления аллостерических эффектов, а также для определения
пространственной структуры актина, которая до этого была определена только в комплексах актина с лигандами. Кроме того, оказалось, что непатогенные
бактерии, синтезирующие протеазу ЕСР32, способны проникать в эукариотические клетки и вызывать реорганизацию их цитоскелета. Результаты
секвенирования гена 16S рРНК и 48 биохимических тестов автоматизированной системы Vitek-2 показали, что бактерии-продуценты протеазы ЕСР32 -
это не Е. coli, как было определено ранее на основании рутинных микробиологических тестов, a Serratia grimesii. В бактериях референтного
штамма S. grimesii выявлен ген ЕСР32-подобной металлопротеиназы. Ген клонирован, секвенирован и экспрессирован в Е. coli. Белок,
кодируемый этим геном, был назван гримелизином. Гримелизин сходен с ЕСР32 по молекулярной массе, последовательности N-концевого фрагмента,
способности ограниченно расщеплять актин в сайте Gly42-Val43 и чувствительности расщепления к действию хелаторов. Данные указывают на то, что
гримелизин и ЕСР32 - это один и тот же фрагмент. По данным конфокальной микроскопии, бактерии, синтезирующие природный и рекомбинантный
гримелизин, приобретают инвазивные свойства. Описанные данные позволяют предположить, что актин является белком-мишенью, протеолиз которого
способствует проникновению бактерий в клетки.
Ключевые слова: актин, протеолиз актина, металлопротеиназы, протеаза ЕСР32, гримелизин, бактериальная инвазия
Back
Contents
Main
