РОЛЬ ТРАНСКРИПЦИОННЫХ ФАКТОРОВ ZF5 И CGGBP-20 В РЕГУЛЯЦИИ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА FMR1, ОТВЕТСТВЕННОГО ЗА СИНДРОМ ЛОМКОЙ
X-ХРОМОСОМЫ ЧЕЛОВЕКА
П. В. Гулый,1 С. В. Орлов,1,2 Э. Б. Диже,2 К. Б. Кутейкин-Тепляков,2,3 И. А. Игнатович,2
С. В. Жук,1 А. П. Перевозчиков 1,2,*
1 Кафедра эмбриологии С.-Петербургского государственного университета,
2 НИИ экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург,
и 3 Отдел нейробиохимии Рурского университета, Бохум, Германия;
* электронный адрес: app@iem.sp.ru
Ген FMR1 человека кодирует РНК-связывающий белок, принимающий участие в регуляции трансляции. 5'-регуляторная область FMR1
содержит большое количество тандемных тринуклеотидных GCC-повторов (5-50), увеличение числа которых (более 200) ответственно за синдром ломкой
X-хромосомы (врожденной аномалии развития человека). Как предполагается, по меньшей мере два фактора транскрипции способны специфически
взаимодействовать с триплетными повторами (GCC)n - CGGBP-20 и ZF5. В настоящей работе изучена роль этих факторов в регуляции экспрессии гена
FMR1. Избирательное связывание рекомбинантного белка ZF5 с последовательностью (GCC)9 показано методом гель-ретардации.
Тканеспецифическое распределение белка ZF5 в клетках млекопитающих перекрывается с известными районами экспрессии гена FMR1. С помощью
специфической интерферирующей РНК (иРНК-ZF5) показано, что угнетение активности экспрессии гена ZF5 в клетках гепатомы человека HepG2
вызывает стимуляцию экспрессии гена FMR1 в этих клетках по меньшей мере в 1.5 раза. Это обстоятельство указывает на негативный характер регуляции
экспрессии гена FMR1 фактором транскрипции ZF5. 5'-регуляторная область FMR1 содержит помимо GCC-повторов классические ("канонические")
сайты связывания ZF5, локализованные вблизи точек инициации транскрипции. С целью выяснения вклада триплетных повторов GCC в регуляцию экспрессии гена
FMR1 факторами транскрипции ZF5 и CGGBP-20 созданы две генетические конструкции, содержащие репортерный ген люциферазы под контролем
клонированного делеционного варианта 5'-регуляторной области гена FMR1 человека и отличающиеся наличием в этой области триплетных повторов
(GCC)9. В экспериментах по котрансфекции клеток гепатомы человека HepG2 данными генетическими конструкциями совместно с векторами
экспрессии генов ZF5 и (или) CGGBP-20 установлено, что ZF5 подавляет активность 5'-регуляторной области FMR1 через классические сайты
связывания. Более того, присутствие GCC-повторов ослабляет подавляющий эффект ZF5 на активность 5'-регуляторной области FMR1. CGGBP-20 подавляет
активность 5'-регуляторной области FMR1 только в присутствии триплетных повторов GCC. Полученные данные свидетельствуют о разнонаправленном
действии фактора транскрипции ZF5 на ген FMR1, что может объяснять показанное ранее повышение уровня иРНК FMR1 у носителей премутантных
аллелей.
Ключевые слова: GCC-триплетные повторы, синдром ломкой Х-хромосомы, регуляция транскрипции гена FMR1,
факторы транскрипции ZF5, CGGBP-20
| Pdf |
Back |
Contents |
Main |
|
