2009. Том 51, № 1, c. 20-25
МНОГОПАРАМЕТРИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ И КЛАСТЕР-АНАЛИЗ ПЕРЕВИВАЕМЫХ КУЛЬТУР КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА

Ю. А. Магакян,1 Е. М. Каралова, 3. А. Каралян, Л. О. Аброян, Л. А. Акопян, М. Г. Гаспарян, Н. Г. Джагацпанян, 3. Б. Семерджян, 3. Р. Тер-Погосян

Институт молекулярной биологии НАН РА, Ереван;
1 электронный адрес: tigmag@sci.am

Методами сканирующей цитофотометрии, цитохимии и цитоморфометрии проведено многопараметрическое исследование клеток гепатокарциномы (HEp-G2), аденокарциномы толстого отдела кишечника (Сасо-2), эмбриональной почки (НЕК-293), нейробластомы (SH-SY5Y), рабдомиосаркомы (RD) и рака гортани (Нер-2), через 48, 72 и 96 ч после начала культивирования. Определяли значения плотности монослоя, активности пролиферации, число мертвых клеток, количество ДНК в ядрах и распределение клеток в популяциях по этому параметру, суммарную массу ДНК в ядрышках (околоядрышковом хроматине), число ядрышек в ядрах и распределение клеток в популяциях по этому параметру, объем и площадь поверхности ядра, суммарный объем и площадь поверхности ядрышек. Полученные данные использовали для древовидного кластер-анализа по корреляции Пирсона, в результате которого культуру SH-SY5Y выделили в отдельный кластер, а культуры Сасо-2, HEp-G2, НЕК-293, Нер-2 и RD расположились на древе другого кластера. Оказалось также, что наименее трансформированная культура нейробластомы (SH-SY5Y) не имеет сродства с остальными культурами, проявляющими разную степень близости между собой. Близкими по всем параметрам оказались культуры НЕК-293, Нер-2 и RD. Значимость параметров в формировании общего образа клеточных культур неодинакова. Наибольший "вес" имели параметры, характеризующие популяцию в целом: плотность монослоя, митотический коэффициент и число мертвых клеток; за ними следуют содержание ДНК в ядрах, суммарная площадь ядрышек, отношение содержания ДНК ядрышек к содержанию ДНК ядра и отношение суммарной площади ядрышек к площади ядра. Остальные параметры были не столь существенны.

Ключевые слова:  культура клеток, ядрышки, ДНК, кластер-анализ


Back    Contents    Main