ПРОСТРАНСТВЕННАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ СВЯЗАННЫХ С ЦЕНТРОСОМОЙ И СВОБОДНЫХ МИКРОТРУБОЧЕК В ЦИТОПЛАЗМЕ ФИБРОБЛАСТОВ 3Т3
И. Б. Алиева,1 Г. Г. Бориси,2 И. А. Воробьев 1
1 Институт физико-химической биологии им. А. Н. Белозерского Московского государственного университета им. М. В. Ломоносова
и 2 Северо-Западный Университет Чикаго, США;
1 электронный адрес: irina_alieva@belozersky.msu.ru
Микротрубочки принимают участие во множестве клеточных процессов, для нормального протекания которых важна их пространственная организация
в объеме клетки. Традиционно предполагается, что фибробласты имеют радиальную систему микротрубочек, расходящихся от центросомы. Однако
детальный анализ расположения микротрубочек в глубине клетки не проводился. Для анализа пространственной организации микротрубочек во внутренней
цитоплазме культивируемых фибробластов 3Т3 в настоящей работе в клетки инъецировали флуоресцентно меченный тубулин, затем с помощью лазерного
облучения обесцвечивали меченые микротрубочки и наблюдали характер роста и взаиморасположение вновь полимеризующихся сегментов микротрубочек
вблизи центросомы и в удаленных частях цитоплазмы. В большинстве случаев рост микротрубочек в обесцвеченной зоне происходил прямолинейно, на
расстоянии до 5 мкм их изгиб редко превышал 10-15°. Растущий фрагмент микротрубочки рассматривали как вектор с началом в точке появления и концом
в точке окончания роста (или через 30 с, если непрерывный рост продолжался дольше). По полученным векторам определяли направление роста
микротрубочек в разных участках клетки, анализируя угол отклонения их от вектора сравнения. В районе центросомы использовали вектор, направленный
внутри обесцвеченной полосы от центросомы клетки к началу растущего сегмента микротрубочки, а в ламелле фибробласта и его хвосте использовали
вектор, направленный вдоль длинной оси клетки от ее геометрического центра к периферии. Микротрубочки, начинающие свой рост непосредственно от
центросомы, растут вдоль радиуса клетки. Однако на расстоянии 10 мкм от центросомы радиально растущие микротрубочки составляют 40 % от общего
числа, на расстоянии 20 мкм - 25 %. Остальные микротрубочки росли в разных направлениях, преимущественный угол между направлением их роста и
радиусом составлял около 90°. В ламелле и хвосте фибробласта 80 % всех микротрубочек растут вдоль длинной оси клетки или под углом не более 20°,
10-15 % микротрубочек растут в направлении центросомы. Таким образом, в фибробластах 3Т3 радиальная система микротрубочек существует только на
расстоянии нескольких микрометров от центросомы. Во внутренней цитоплазме система микротрубочек полностью не упорядочена, и в вытянутых частях
поляризованной клетки (ламелла, хвост) система микротрубочек вновь становится упорядоченной - они вытянуты вдоль длинной оси клетки. На основании
полученных данных мы полагаем, что упорядоченность микротрубочек на периферии фибробласта не является следствием их роста от центросомы, а их
ориентация задается локальными факторами.
Ключевые слова: центросома, связанные с центросомой микротрубочки, свободные микротрубочки, организация системы микротрубочек,
видеомикроскопия, флуоресценция
Back
Contents
Main
