2008. Том 50, № 1. c. 29-39
УЛЬТРАСТРУКТУРА ХРОМАТИНА В САЙТАХ РЕПЛИКАЦИИ

С. А. Голышев, В. Ю. Поляков

Институт физико-химической биологии им. А. Н. Белозерского Московского государственного университета;
электронный адрес: sergei.golyshev@mail.genebee.msu.ru

Преобразования структуры хроматина в ходе транскрипции и репликации ДНК являются объектом углубленного изучения, что связано с ключевой ролью, которую играет упаковка ДНК в хроматин в регуляции этих внутриядерных процессов. В настоящей работе на ультраструктурном уровне изучена организация хроматина в сайтах репликации ДНК в ядрах клеток, зафиксированных in situ и пермеабилизированных в растворах с низкой ионной силой в присутствии двухвалентных катионов. Последний метод позволяет стабилизировать макромолекулярные комплексы хроматина — хромомеры и хромонемы. Новореплицированную ДНК выявляли с помощью антител к БрдУ непосредственно на поверхности ультратонких срезов. Показано, что реплицируемая ДНК выявляется преимущественно в зонах декомпактизации хромомерных элементов и представлена глобулярными и фибриллярными структурами с характерным диаметром 30 нм. ДНК, завершившая репликацию, входит в состав плотных хроматиновых структур диаметром 60—100 нм. Полученные данные обсуждаются в связи с представлениями об иерархии структурных уровней организации генома.

Ключевые слова:  репликация ДНК, репликационный сайт, хроматин, хромонема, хромомер, нуклеомер, электронная микроскопия


Back    Contents    Main