МИКРОФЛУОРИМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ДИНАМИКИ ГЕНОМНЫХ ИЗМЕНЕНИЙ ФИБРОБЛАСТОВ КИТАЙСКОГО ХОМЯЧКА CHL V-79 RJK
C МНОЖЕСТВЕННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТЬЮ
Т. М. Гринчук,1 И. Э. Ушал, И. В. Арцыбашева, М. А. Павленко , Б. Н. Кудрявцев
Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург;
1 электронный адрес: gmdmk@mail.cytspb.rssi.ru
Сравнивали результаты кариотипирования и микрофлуориметрического определения содержания
ДНК в хромосомах клеток CHL V-79 RJK, отселектированных на устойчивость к бромистому этидию
(БЭ), вызывающему множественную лекарственную устойчивость (МЛУ) (линия Vebr-5). Анализ проводили
на 11-м и 88-м пассажах. Изучение структуры кариотипа Vebr-5 выявило наличие дополнительного
генетического материала (ДГМ) в виде гомогенно или дифференциально окрашенных областей (ГОО и
ДОО) в двух хромосомах (Z1 и Z6, локусы 1p29-31 и 1q26 соответственно). ДОО (ГОО) в Z6 по месту локализации
гена mdr дикого типа имели нестабильные длину и структуру, что характерно для морфологических
маркеров амплификации генов семейства mdr. При продолжительном культивировании Vebr-5 в
присутствии БЭ (88 пассажей) нестабильность ГОО (ДОО) в Z6 возрастала. Результаты микрофлуориметрического
анализа Vebr-5 на 11-м пассаже показали достоверное увеличение содержания ДНК не
только в хромосомах Z1 и Z6, маркированных ГОО (ДОО), но и еще в трех хромосомах (Z5, Z12 и Z13),
не имеющих визуальных морфологических изменений. Соответствующий анализ на 88-м пассаже выявил
неслучайные изменения содержания ДНК еще в четырех хромосомах: увеличение — в Z14, уменьшение—
в хромосомах 8, Z7 и Z9. Уменьшение содержания ДНК в хромосомах рассматривается в связи с делетированием
генетического материала, увеличение — как результат транслокации и (или) амплификации.
Коэффициент вариации изменения содержания ДНК для крупных хромосом составил около 9, а для мелких
— около 26 %. Это свидетельствует о том, что мелкие хромосомы обладают большими потенциями к
нестабильности, чем крупные. Полученные данные не только подтверждают, но и расширяют представление
о направленности и характере дестабилизации генетического аппарата клеток, вставших на путь неопластической
трансформации в связи с приобретением ими МЛУ.
Ключевые слова: дестабилизация кариотипа, дополнительный генетический материал, микрофлуориметрия,
множественная лекарственная устойчивость, содержание ДНК в хромосомах
Back
Contents
Main
