ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЛИЧЕСТВЕННЫХ ПАРАМЕТРОВ ФАГОЦИТОЗА ESCHERICHIA COLI ПЕРИТОНЕАЛЬНЫМИ МАКРОФАГАМИ МЫШИ
В. В. Милюкене,1,* Г. Ю. Бизюляеичене,2,3 Л. П. Хаустова,1
А. В. Пилинкене,3 Г. А, Бизюлявичюс 3
1 Институт биохимии, Вильнюс, 2 Естественнонаучный факультет Вильнюсского университета и
3 Институт иммунологии Вильнюсского университета, Литва;
* электронный адрес: valem@bchi.it
Методом флуориметрии были исследованы количественные параметры фагоцитоза меченных флуоресцеином клеток
Escherichia coli перитонеальными макрофагами мыши. Клетки Е. coli конъюгировали с
флуоресцеинизотиоцианатом (ФИТЦ), а затем инкубировали с макрофагами. Фагоцитоз останавливали добавлением лизирующего
раствора (0.5%-ный раствор Тритона Х-100 в 0.01 М фосфатном буфере на 0.15 М физиологическом растворе, рН 7.4).
Трипановый синий в концентрации 0.04 % применяли как гасящий агент для различения прикрепившихся и переваривающихся
клеток Е. coli. Анализ показал, что фагоцитоз клеток Е. coli зависит от температуры и опсонизации
бактерий. Число клеток Е. coli, переваренных макрофагами, быстро увеличивалось в первые 60 мин инкубации при
37 °С. Для достижения оптимального поглощения клеток Е. coli необходима их опсонизация 5%-ной нативной
сывороткой. Поглощение неопсонированных бактерий макрофагами было ниже, чем опсонированных (Р < 0.05).
Показано, что азид натрия вызывает дозозависимое угнетение фагоцитоза клеток Е. coli перитонеальными
макрофагами.
Ключевые слова: Escherichia coli, макрофаги, фагоцитоз, флуориметрия
Back
Contents
Main
|
