КИНЕТИКА ПРОЛИФЕРАЦИИ, ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ И ТРАНСКРИПЦИИ ГЕНОВ, РЕГУЛИРУЮЩИХ АПОПТОЗ,
bcr/abl+Ph+-КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА В КУЛЬТУРЕ
Т. В. Ахлынина, Л. П. Герасимова, Г. П. Саркисян, Т. В. Боровкова, Е. А. Духовенская, Т. Е. Манакова,
Н. М. Найденова, А. М. Тимофеев, Н. И. Гринева 1
Гематологический научный центр РАМН, Москва;
1 электронный адрес: ngrineva@blood.ru
Хромосомная транслокация t(9,22) в кроветворных стволовых клетках человека ведет к образованию
bcr/abl+Ph+-клеток, способных к дифференцировке с заметным подавлением апоптоза.
Ph+-хромосома и онкоген bcr/abl являются маркерами хронического миелолейкоза. При прогрессии
хронического миелолейкоза (ХМЛ) в результате дополнительных мутаций или активации пролиферации Ph+-клеток,
возникающих при транслокации и способных к самоподдержанию, накапливаются злокачественные бласты -
bcr/abl+Ph+-клетки с блоком дифференцировки. Механизмы реально протекающих при ХМЛ
превращений не известны. С целью найти клеточную модель и разработать подход к изучению закономерностей
функционирования дифференцирующихся D-Ph+-клеток и их превращения в злокачественные
bcr/abl+Ph+-клетки с блоком дифференцировки (лейкозные бласты) изучена кинетика
пролиферации, дифференцировки, гибели клеток и транскрипции генов, регулирующих апоптоз, в суспензионной культуре
Ph+-мононуклеаров, выделенных из периферической крови больного ХМЛ до начала лечения. Установлено, что
дифференцировка D-Ph+-клеток в 14-суточной культуре протекает по известной схеме усиленного миелопоэза,
характерного для хронического миелолейкоза. В культуре до 3/4 накопления и расходования всех
Ph+-мононуклеаров составляют клетки миелоидного ростка кроветворения, до 95 % которых представляют
дифференцирующиеся гранулоциты. Пролиферация и дифференцировка протекают с многократным накоплением
Ph+-клеток, с их значительной гибелью и новым этапом пролиферации в конце культивирования. Максимальную
концентрацию дифференцирующихся гранулоцитов составляют миелоциты, соотношение скоростей накопления и расходования
которых свидетельствует о замедлении их превращения в метамиелоциты на следующей стадии дифференцировки. Кинетика
культивирования характеризует гибель клеток на отдельных стадиях дифференцировки: гибель пролиферирующих клеток,
миелоцитов и зрелых клеток. Кинетика индекса P/D (отношения числа незрелых Ph+-гранулоцитов,
дифференцирующихся с делением к дифференцирующимся без деления метамиелоцитам и зрелым нейтрофилам) выявляет активную
пролиферацию в начале культивирования и, что неожиданно, новый этап ее активации в конце культивирования в
присутствии факторов роста. Максимум транскрипции антиапоптотических генов bcr/abl и mdm2 совпадает
с пиком пролиферации Ph+-гранулоцитов в начале и активацией пролиферации в конце культивирования.
Пролиферация и дифференцировка Ph+-гранулоцитов заметно ускоряются в присутствии факторов роста; в конце
культивирования при значительном падении концентрации D-Ph+-клеток пролиферация вновь активируется.
Кинетика культивирования Ph+-клеток является весьма информативным подходом для изучения непрерывной
регуляции клеточных и молекулярных процессов при ХМЛ in vitro и позволяет более полно судить о процессе
кроветворения.
Ключевые слова: гемопоэтические Ph+-клетки, кинетика пролиферации, дифференцировки и
апоптоза in vitro, транскрипция генов bcr/abl, bcl2, mdm2 и p53 при культивировании
Ph+-клеток
Back
Contents
Main
|
