ТОМ 48 (2006), № 7, c. 610-616
СУБСТРАТНАЯ СПЕЦИФИЧНОСТЬ ФОСФАТАЗ У AMOEBA PROTEUS

В. А. Сопина

Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург;
e-mail: vsop39@mail.ru

Все три фосфатазы ("медленная", "средняя" и "быстрая"), выявляемые у амебы Amoeba proteus после диск-электрофореза надосадочной жидкости гомогенатов в ПAАГ и при использовании в качестве субстрата 1-нафтилфосфата (рН 9.0), характеризуются широкой субстратной специфичностью. Для всех фосфатаз предпочитаемым субстратом является n-НФФ. Все фосфатазы гидропизуют бис-n-НФФ и, следовательно, обладают фосфодиэстеразной активностью. Все фосфатазы в большей или меньшей степени гидролизуют О-фосфо-L-тирозин. В субстратной специфичности фосфатаз были обнаружены лишь небольшие различия: 1) "быстрая" и "средняя" фосфатазы слабее, чем "медленная", гидролизуют нафтилфосфаты и О-фосфо-L-тирозин; 2) "быстрая" и "средняя" фосфатазы гидролизуют 1-нафтилфосфат в большей степени, чем 2-нафтилфосфат; 3) "быстрая" и "средняя" фосфатазы по сравнению с "медленной" слабо гидролизуют О-фосфо-L-серин и О-фосфо-L-треонин; 4) "быстрая" фосфатаза в отличие от "средней" и "медленной" почти не гидролизует глюкозо-6-фосфат. Широкая субстратная специфичность "медленной" фосфатазы (рН 9.0) в совокупности с данными ингибиторного анализа и результатами опытов с реактивацией ее ионами Zn2+ после инактивации ЭДТА свидетельствует о том, что только эта фосфатаза может классифицироваться как щелочная (ЩФ; КФ 3.1.3.1). ЩФ амеб секретируется в культуральную среду; активность ее в культуральной среде мала. Вопрос о принадлежности "быстрой" и "средней" фосфатаз к определенному классу остается пока нерешенным.

Ключевые слова:  амеба Amoeba proteus, щелочная фосфатаза, субстратная специфичность


Back    Contents    Main